[發(fā)明專利]Leptin受體親和肽及其應用

有效

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• 申請日: 2021-06-18
• 公開（公告）號: CN113248569B
• 公開（公告）日: 2021-10-12
• 發(fā)明（設計）人: 戴建武;莊燕
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州納米技術與納米仿生研究所
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61L27/22;A61L27/24
• 代理公司: 南京利豐知識產(chǎn)權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒

本發(fā)明公開了一種Leptin受體親和肽及其應用。所述Leptin受體親和肽的序列如SEQ ID No.1所示。本發(fā)明還公開了一種具有膠原結合能力的親和肽，其包括所述Leptin受體親和肽和具有膠原特異結合能力的短肽，該具有膠原特異結合能力的短肽結合在所述Leptin受體親和肽的N端。本發(fā)明的親和肽與Leptin受體具有高親和性，且能夠與MSC特異性結合，將該親和肽連接到生物材料上，連接有具有膠原特異結合能力的短肽的親和肽可實現(xiàn)與膠原支架的特異結合，從而提高生物材料對于表面表達Leptin受體的MSC的募集，獲得更好的組織損傷修復效果，為研究MSC在組織工程修復和靶向治療研究方面提供實驗依據(jù)。

技術領域

本發(fā)明涉及一種Leptin受體親和肽，尤其涉及一種可特異性結合間充質干細胞（MSC）的Leptin受體親和肽及其篩選方法，并應用于組織工程修復，屬于生物醫(yī)藥技術領域。

背景技術

間充質干細胞（mesenchymal stem cells, MSC）主要來源于中胚層，是一類具有高度自我更新能力和分化潛能的成體干細胞，是干細胞家族中的重要成員。MSC最初在骨髓中被發(fā)現(xiàn)，之后的研究發(fā)現(xiàn)MSC主要存在于全身結締組織和器官間質中，目前已經(jīng)可以從骨髓、胎盤、臍帶、脂肪等組織中分離和制備間充質干細胞。基于MSC的多分化潛能，其在體內外特定的誘導環(huán)境中，可以定向分化成骨、軟骨、脂肪、心肌等多種組織細胞。此外，MSC具有低免疫原性的特點，使其可以在移植應用中避免免疫排斥。MSC的這些特點給臨床治療提供了新的治療思路和方案，可以作為組織工程修復中最適合的種子細胞，應用于骨與肌肉退行性疾病、腦血管疾病、自身免疫性疾病等的治療。

在組織工程的發(fā)展過程中，利用支架材料吸附MSC應用于組織損傷修復再生已經(jīng)被廣泛認同。但由于體液的流動性，外源簡單滴加到材料上的MSC和體內循環(huán)MSC均無法在支架材料上長時間停留，因此也無法發(fā)揮其分化和修復的作用。因此，如果可以對支架材料進行表面修飾，連接上與MSC具有強結合力的蛋白或多肽，從而提高MSC在材料表面的粘附率，必將更好地發(fā)揮支架材料上MSC的再生能力，提高支架材料的修復效果。在新近的研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)，MSC中具有良好增殖分化能力的一小部分細胞表面表達Leptin受體，如果能找到能與Leptin受體具有強結合力的親和肽，那就可以將之修飾到支架材料表面，使其作為橋梁作用特異性結合這一部分具有良好增殖分化能力的MSC。

如何去尋找Leptin受體親和肽，噬菌體展示技術提供了成熟的解決方案。大量的研究已經(jīng)證實，噬菌體展示技術在研究多肽或蛋白質的性質、相互識別和相互作用方面發(fā)揮了重要的作用。通過編碼多肽的外源DNA片段與噬菌體表面蛋白的編碼基因融合后，以融合蛋白的形式呈現(xiàn)在噬菌體的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相對的空間結構和生物活性，展示在噬菌體的表面。噬菌體展示隨機肽庫技術由噬菌體展示技術基礎上發(fā)展而來，當導入了大量具有不同外源基因的噬菌體后，就構成一個可以展示大量不同外源肽的噬菌體展示庫。噬菌體展示肽庫的優(yōu)勢在于它將蛋白質與其遺傳信息之間提供了直接的物理聯(lián)系，因此可以有效的對所需功能的克隆進行反復篩選，并隨之對其進行擴增，并獲得這些特異結合的外源肽所對應的基因序列，并在后期可以對這些多肽進行生物學功能的研究。在文庫篩選的過程中，特定的噬菌體克隆由于對其配體的特異親和性而不斷的得到富集，從而使相對稀少的可以結合配體的克隆能夠快速、有效地從一個大文庫中被篩選出來。

因此，如何獲得一種可與Leptin受體具有高度親和性，并與MSC特異性結合的多肽，以及將其應用于組織工程修復，已然成為業(yè)界研究人員長期以來一直努力的方向。

發(fā)明內容

本發(fā)明的主要目的在于提供一種可特異結合間充質干細胞（MSC）的Leptin受體親和肽，以克服現(xiàn)有技術中的不足。

本發(fā)明的另一目的還在于提供所述Leptin受體親和肽的應用。

為實現(xiàn)前述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案包括：

本發(fā)明實施例提供了一種Leptin受體親和肽，它的序列如SEQ ID No.1所示。