[發明專利]一種能夠沉默S100A4基因的遞送系統及其用途

有效

• 申請號: 202110673363.1
• 申請日: 2021-06-17
• 公開（公告）號: CN113384553B
• 公開（公告）日: 2022-09-23
• 發明（設計）人: 丁國斌;馬曉慧;李卓玉;楊鵬
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/59;A61K31/7088;A61P35/00;A61P35/04;C08G81/00
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

本發明屬于化學合成、生物化學、藥劑學領域，具體涉及一種能夠沉默S100A4基因的遞送系統及其用途。本發明通過低pH敏感基團苯甲亞胺鍵連接PEG和PEI，合成腫瘤酸度敏感的PEG?PEI共聚物，通過靜電相互作用絡合針對S100A4的siRNA，得到PEG?PEI@siS100A4納米復合物，以實現siRNA的高效靶向遞送。不僅可以為腫瘤酸性微環境靶向納米藥物設計提供新策略，而且為腫瘤的基因治療提供新思路。

技術領域

本發明屬于化學合成、生物化學、藥劑學領域，具體涉及一種能夠沉默S100A4基因的遞送系統及其用途。

背景技術

RNA干擾(RNA interference,RNAi)是一種序列特異性的基因調控機制，由雙鏈RNA(dsRNA)觸發，通過內源性microRNA(miRNA)或人工合成的小干擾RNA(siRNA)等核酸分子來抑制基因的表達。RNA干擾已經成為癌癥治療的一種有效手段，可以抑制幾乎任何基因。然而，裸露的siRNA分子量和體積大、不能有效穿透細胞膜、對核酶敏感、容易被腎臟快速清除、容易引起免疫原性和脫靶效應，嚴重阻礙了其在腫瘤治療中的應用。

發明內容

本發明的目的之一，提供一種能夠沉默S100A4基因的遞送系統，所述遞送系統為由PEG-PEI共聚物通過靜電相互作用絡合針對S100A4的siRNA，得到的PEG-PEI@siS100A4納米復合物，所述PEG-PEI共聚物是通過低pH敏感基團苯甲亞胺鍵連接PEG和PEI而成，所述siRNA的序列如下：

5'-GGACAGAUGAAGCUGCUUUTT-3'。

進一步的，所述PEG-PEI共聚物由以下步驟制備而成：

S1、PEG與對甲酰苯甲酸反應生成PEG-CHO；

S2、PEG-CHO與PEI通過邁克爾加成反應生成PEG-PEI共聚物。

更進一步的，S1具體包括：

(1)將PEG和二氯甲烷按照8-10g:145-155mL的質量體積比混合、攪拌至PEG完全溶解，然后在溶液中依次加入對甲酰苯甲酸5-7g、DCC 8-8.5g、DMAP 1-1.2g，密封攪拌，反應20-24h；

(2)將步驟(1)中反應得到的溶液過濾直至濾液澄清，將濾液在38-40℃濃縮至有顆粒狀樣品出現；

(3)將濃縮得到的樣品用異丙醇溶解，并將得到的溶液過濾至澄清，將濾液放置在冰水混合物中，過夜冷卻重結晶，過濾得到晶體，將得到的晶體先用異丙醇洗滌，再用乙醚洗滌，如此重復操作3次；洗滌完成后，將晶體干燥至粉末狀，即得到PEG-CHO。

更進一步的，S2具體包括：

將濃度為0.2g/mL的PEG-CHO水溶液和濃度為0.4g/mL的PEI水溶液按照1:1的體積比混合，攪拌反應2h，后將其用液氮速凍，之后凍干24h，即得PEG-PEI共聚物。

更進一步的，所述PEG-PEI@siS100A4納米復合物具體由以下步驟制備：將PEG-PEI共聚物制成1mg/mL的PEG-PEI溶液后，將PEG-PEI共聚物與siRNA按照N/P為3-7.5:1的比例絡合，室溫下孵育30min，制得所述遞送系統。

本發明的目的之二，提供所述的一種能夠沉默S100A4基因的遞送系統在制備治療癌癥的藥物中的用途。

進一步的，所述癌癥為人卵巢癌。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：