[發明專利]一種修復有機污染土壤的木質纖維基負載微生物材料的制備方法

有效

• 申請號: 202110669009.1
• 申請日: 2021-06-16
• 公開（公告）號: CN113512425B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 朱紅祥;謝冬燕;廖長君;曹斐姝;蘇建;楊崎峰;顏德鵬;韋湘貴
• 申請（專利權）人: 廣西博世科環保科技股份有限公司
• 主分類號: C09K17/32
• 分類號: C09K17/32;C09K17/40;C12N11/12;B09C1/00;B09C1/10
• 代理公司: 南寧智卓專利代理事務所(普通合伙) 45129
• 代理人: 鄧世江

1.一種修復有機污染土壤的木質纖維基負載微生物材料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)木質纖維基的提取及純化：選取農業廢棄物進行機械絞碎，過土壤篩篩分處理，篩分后的固體顆粒進行堿液浸泡，堿液浸泡后的固體顆粒在高溫壓力鍋內蒸煮，蒸煮完成后冷卻至室溫，收集濾液滴加酸性溶液調節pH，待濾液中的固體完全析出后過濾，濾渣依次利用酸性溶液、蒸餾水洗滌多次，冷凍干燥24h至恒重，即得到木質纖維基材料；

(2)氨基酸改性木質纖維基：在燒杯中先加入木質纖維基和蒸餾水，攪拌均勻后滴加堿液調節溶液pH，將調節完pH的混合液移至三口瓶，在三口瓶中依次加入氨基酸和甲醛，攪拌反應，恒溫酸析，酸析完成后將反應液冷卻至室溫，固液分離，濾渣先通過蒸餾水洗滌多次，再冷凍干燥24h至恒重，即得到氨基酸改性木質纖維基，其中，所述氨基酸為賴氨酸、精氨酸、天冬酰胺中的任一種，所述溶液pH值調節至9-11，所述木質纖維基、甲醛、氨基酸的質量比為3：(3.0-6.0)：(2.0-8.0)，所述木質纖維基與氨基酸反應時間為4-6h；

(3)水熱法制備摻雜N、P氨基酸改性木質纖維基材料：先在燒杯中依次加入磷酸銨鹽和蒸餾水，攪拌均勻，然后加入氨基酸改性木質纖維基材料，攪拌均勻，將混合液移至高溫高壓反應釜內反應一定時間，冷卻至室溫，進行酸析，酸析完成后固液分離，濾渣先通過蒸餾水洗滌多次，再冷凍干燥24h至恒重，即得到摻雜N、P氨基酸改性木質纖維基材料；

(4)微生物菌種負載：取一定量菌種接種至活化的CPDA培養基中，即得到菌種活化液，在一定溫度下培養，然后將菌種活化液浸泡至摻雜N、P的氨基酸改性木質纖維基中，混合均勻，靜置培養一段時間，離心傾倒上清液，冷凍干燥，即得到負載微生物的木質纖維基；

在步驟(1)中，所述土壤篩目數為6-20目，所述高溫壓力鍋蒸煮時間為1.5-3.0h，蒸煮溫度為160-180℃，所述濾液pH值調節至3-4。

在步驟(3)中，所述磷酸銨鹽為磷酸銨、磷酸二氫銨、磷酸氫銨、次磷酸銨中的任一種；

在步驟(3)中，所述氨基酸改性木質纖維基、磷酸銨鹽、蒸餾水的質量比為2.0:(0.5-1.5):(10-20)，反應時間為2-4h，反應溫度為175℃-260℃；

在步驟(4)中，所述菌種為桿狀革蘭氏陰性菌體，所述菌種活化液培養溫度為30℃，培養時間為24h；

在步驟(4)中，所述菌種活化液和摻雜N、P氨基酸改性木質纖維基材料的質量比為(2-5)：(1-2)，所述菌種活化液在N、P氨基酸改性木質纖維基材料中靜置培養時間為8-12h。

2.如權利要求1所述的一種修復有機污染土壤的木質纖維基負載微生物材料的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中，所述農業廢棄物包括水稻秸稈、玉米秸稈、小麥秸稈、黃豆秸稈、稻殼、花生殼中的一種或幾種。