[發(fā)明專利]一種病毒基因組核酸快速提取試劑盒及其使用方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110657003.2 | 申請日： | 2021-06-11 |
| 公開（公告）號： | CN113215148B | 公開（公告）日： | 2022-08-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張其威;吳建國;譚秋萍 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣東龍帆生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京金智普華知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11401 | 代理人： | 藍(lán)曉玉 |
| 地址： | 528315 廣東省佛山市順德區(qū)*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 病毒 基因組 核酸 快速 提取 試劑盒 及其 使用方法 | ||
1.一種病毒基因組核酸快速提取試劑盒，其特征在于，所述病毒基因組核酸快速提取試劑盒包含5-15mL的溶液I；所述溶液I包括1-4moL異硫氰酸胍、10-25mmoL檸檬酸三鈉、10-20mmoL二硫蘇糖醇和0.01-0.1％(m/v)糖原；
所述基因組核酸快速提取試劑盒進(jìn)一步包含：
10-20mL的溶液II、25-30mL的溶液III、1.5-2mL的Eluent、多支制備管、多支2mL離心管、多支1.5mL離心管和使用說明書；
所述溶液II包括40-60％異丙醇和2-4moL乙酸鈉，pH小于等于5；
所述溶液III包括60-75％乙醇和1-10mM的Tris-HCl，Tris-HCl的pH為6.5-8.0；
所述Eluent包括1-10mM/L的Tris-HCl和0.1-1mM/L的EDTA；
所述Tris-HCl的pH為7-9；
所述病毒基因組核酸快速提取試劑盒的使用方法包括以下步驟：
步驟一，取待抽提的含有核酸的液體50ul，置于0.6mL或1.5mL離心管中，加入200ul溶液I，上下反轉(zhuǎn)顛倒充分混勻，室溫放置1-5min；
步驟二，加入250ul溶液II，上下反轉(zhuǎn)顛倒混合均勻；吸取混合液，轉(zhuǎn)移到DNA制備管，DNA制備管事先置于2ml離心管中，10000-13000×g離心1-3min，棄濾液；
步驟三，將制備管置回2ml離心管，加500μl溶液III，10000-13000×g離心30-60s，棄濾液；
步驟四，將制備管置于2ml離心管中，10000-13000×g離心30-90s；
步驟五，將制備管置于潔凈的1.5ml離心管中，在制備膜中央加20-50μlEluent，在制備膜中央加20-50μl Eluent之前，將Eluent加熱至50-65℃，室溫靜置1-3min，10000-13000×g離心1-3min洗脫DNA/RNA。
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