[發明專利]用于鑒定萊姆病螺旋體的引物探針組合物以及它們的應用

在審

• 申請號: 202110653769.3
• 申請日: 2021-06-11
• 公開（公告）號: CN115466795A
• 公開（公告）日: 2022-12-13
• 發明（設計）人: 張小愛;劉瑋;蔣寶貴;李月
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 何葉喧

本發明公開了一種用于鑒定萊姆病螺旋體的引物探針組合物以及它們的應用。本發明提供了一種引物探針組，由上游引物F、下游引物R和探針P組成；上游引物F為序列表的序列1所示的單鏈DNA分子，下游引物R為序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；探針P如序列表的序列3所示，且5’末端標記熒光基團，3’末端標記淬滅基團。本發明提供了用于針對萊姆病螺旋體的引物探針組，并進一步開發了基于探針法檢測萊姆病螺旋體的熒光定量PCR檢測方法，可廣泛應用于萊姆病螺旋體的檢測。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及螺旋體檢測領域，更具體涉及一種用于鑒定萊姆病螺旋體的引物探針組合物以及它們的應用。

背景技術

萊姆病(Lyme disease)是由不同基因型的伯氏疏螺旋體(又稱為萊姆病螺旋體)引起的自然疫源性疾病,主要經蟲叮咬人、獸而傳播。萊姆病可引起多系統、多器官損害，臨床表現為游走性紅斑、神經炎、心肌炎等，嚴重者可致殘，甚至死亡。患者如得不到早期診斷和及時治療，致殘率較高，對人類健康危害甚大。伯氏疏螺旋體(Borrelia burgdorferi)屬于原核生物界、螺旋體綱、螺旋體目、螺旋體科、疏螺旋體屬。我國于1986年首次在黑龍江省林區發現萊姆病病例。近年來，隨著蜱媒宿主范圍的不斷擴大，萊姆病在我國的發病率呈不斷上升態勢。目前，世界上已有70多個國家報告發現萊姆病，且發病率呈上升趨勢，已成為全球性的公共衛生問題。

發明內容

為了解決現有技術中對于萊姆病螺旋體檢測效率低且效果差的技術問題，本發明提供了一種用于鑒定萊姆病螺旋體的引物探針組合物以及它們的應用。

本發明提供了一種引物探針組，由上游引物F、下游引物R和探針P組成；

上游引物F為序列表的序列1所示的單鏈DNA分子，下游引物R為序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；探針P如序列表的序列3所示，且5’末端標記熒光基團，3’末端標記淬滅基團。

探針P為單鏈DNA分子。

所述探針P中，5’末端標記FAM熒光基團，3’末端標記MGB淬滅基團。

所述引物探針組中，上游引物F、下游引物R和探針P的摩爾配比具體可為1:1:1。

所述引物探針組到的功能為如下(a)或(b)：

(a)鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體；

(b)檢測待測樣本是否感染了伯氏疏螺旋體。

本發明還保護所述引物探針組在制備試劑盒中的應用；

所述試劑盒的功能為如下(a)或(b)：

(a)鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體；

(b)檢測待測樣本是否感染了伯氏疏螺旋體。

本發明還保護一種試劑盒，包括所述引物探針組；

所述試劑盒的功能為如下(a)或(b)：

(a)鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體；

(b)檢測待測樣本是否感染了伯氏疏螺旋體。

本發明還保護所述引物探針組的應用，為如下(a)或(b)：

(a)鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體；

(b)檢測待測樣本是否感染了伯氏疏螺旋體。

本發明還保護所述試劑盒的應用，為如下(a)或(b)：

(a)鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體；

(b)檢測待測樣本是否感染了伯氏疏螺旋體。

本發明還保護一種鑒定或輔助鑒定伯氏疏螺旋體的方法，包括如下步驟：