[發明專利]一種菌酶聯合降解聚對苯二甲酸乙二醇酯的方法

有效

• 申請號: 202110651807.1
• 申請日: 2021-06-11
• 公開（公告）號: CN113337001B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 邱樂泉;吳石金;李彤彤;尹辛格
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C08J11/10;C08L67/02
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.一種菌酶聯合降解聚對苯二甲酸乙二醇酯的方法，其特征在于所述方法為：以變棲克雷伯氏菌SY1(Klebsiella variicola SY1)經擴大培養獲得的細胞懸液和南極假絲酵母角質酶為催化劑，以聚對苯二甲酸乙二醇酯為底物，以pH 7.0-9.0的緩沖液為反應介質構成反應體系進行降解反應，降解反應過程中，底物和南極假絲酵母角質酶先加入緩沖液中，60℃降解反應5天后，再加入變棲克雷伯氏菌SY1細胞懸液，30℃降解1天后升溫至60℃繼續降解5天，使聚對苯二甲酸乙二醇酯高聚物降解為單體化合物；所述變棲克雷伯氏菌SY1，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M 2020198，保藏日期2020年6月10日，地址中國武漢，武漢大學，郵編430072。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述緩沖液為pH 8.0、50-100mM Tris-HCl緩沖液。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述聚對苯二甲酸乙二醇酯結晶度為10-30％。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于所述聚對苯二甲酸乙二醇酯為lcPET或boPET，其中lcPET為結晶度11.62％的塑料顆粒；boPET為結晶度26.49％的塑料膜。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述底物加入量以緩沖液體積計為1-5mg/mL。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述南極假絲酵母角質酶為南極假絲酵母角質酶HiC，所述南極假絲酵母角質酶HiC加入量以蛋白含量計為10-50μg/mL緩沖液。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述細胞懸液是將變棲克雷伯氏菌SY1接種至LB培養基，30℃培養1天至對數生長期，然后用PBS緩沖液洗滌三次，最后將菌體重懸于PBS緩沖液中，獲得細胞懸液；所述緩沖液中細胞懸液加入量為2～8×10⁹cfu/mL。