[發明專利]一種級聯納米酶及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202110649536.6
• 申請日: 2021-06-10
• 公開（公告）號: CN113549611B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 穆婧;黃鵬
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: C12N11/02
• 分類號: C12N11/02;B01J23/42;B01J31/22;A61K38/44;A61K33/243;A61K9/51;A61K47/22;A61K47/32;A61K47/10;A61P1/16;A61P9/10;A61P39/06
• 代理公司: 深圳市君勝知識產權代理事務所(普通合伙) 44268
• 代理人: 劉芙蓉

本發明公開一種級聯納米酶及其制備方法與應用，所述級聯納米酶包括金屬有機骨架載體、與所述金屬有機骨架載體結合的一氧化氮合成酶以及與所述金屬有機骨架載體結合的鉑納米顆粒。級聯納米酶屬于納米尺寸，相比于小分子藥物具有在肝臟被動積累的天然優勢，可增加藥物在肝臟的富集，具有較高的靶向性。鉑納米顆粒作為納米酶具有優異的活性氧(ROS)清除能力，可催化活性氧產生氧氣，產生的氧氣在一氧化氮合成酶(iNOS)的催化下與精氨酸反應原位產生NO，提高了NO的生物利用度。因此，該級聯納米酶提高了NO的靶向性和生物利用度，并且可同時實現ROS的清除和NO的調節，從而實現對肝臟缺血再灌注造成的損傷的有效干預。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及一種級聯納米酶及其制備方法與應用。

背景技術

肝臟外科的迅猛發展離不開外科解剖學的進步，同時也得益于新材料、新技術的應用。臨床中治療肝病如肝臟良惡性腫瘤、肝內膽管結石、肝外傷等最常見的方法是肝臟切除和肝移植。肝臟手術通常需要阻斷肝門而控制血流和減少失血，肝臟在缺血過程中會部分受損，當血流恢復后，缺氧器官損傷加劇，造成肝缺血再灌注損傷(Hepatic?IschemiaReperfusion?Injury，HIRI)。HIRI發生時，大量活性氧(ROS)和細胞炎性因子生成，引起急性炎癥免疫應答反應，造成嚴重的肝功能損傷，甚至引起多器官衰竭和死亡。HIRI病理生理過程復雜,迄今尚缺乏完善的治療方案，在HIRI發生過程中，內源性和外源性一氧化氮(NO)均可緩解HIRI引起的損傷，基于NO的療法在再生醫學領域已表現出巨大的應用前景，吸入NO氣體或使用NO供體藥物已顯示出對HIRI積極的保護作用，然而該領域的研究尚處在早期階段，很多潛在的問題仍未解決：(1)NO氣體的半衰期短，生物利用度低，治療效果不理想；(2)NO供體小分子藥物如亞硝酸鹽和硝普鈉等在體內循環時間較短，無組織特異性，多位點、多途徑的相互作用會導致其潛在的毒副作用，這些都阻礙了他們的臨床應用。因此，提高NO制劑的靶向性和生物利用度，從而進一步提供更安全、可行的HIRI保護措施是未來肝病領域的研究趨勢之一。

發明內容

鑒于上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種級聯納米酶，旨在解決利用NO治療HIRI時，現有NO制劑的靶向性和生物利用率低的問題。

本發明的技術方案如下：

本發明的第一方面，提供一種級聯納米酶，其中，所述級聯納米酶包括金屬有機骨架載體、與所述金屬有機骨架載體結合的一氧化氮合成酶以及與所述金屬有機骨架載體結合的鉑納米顆粒。

可選地，所述一氧化氮合成酶結合在所述金屬有機骨架載體內部，所述鉑納米顆粒結合在所述金屬有機骨架載體內部和所述金屬有機骨架載體表面。

可選地，所述級聯納米酶的粒徑為50-100nm。

可選地，所述鉑納米顆粒的粒徑為1-10nm。

可選地，所述一氧化氮合成酶的質量占所述一氧化氮合成酶與所述金屬有機骨架載體質量和的1％-10％。

可選地，所述金屬有機骨架中的金屬的質量與所述鉑納米顆粒的質量的比為(1-10)：1。

可選地，所述鉑納米顆粒的表面含有第一配體，所述第一配體選自聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物中的一種或多種。

本發明的第二方面，提供一種本發明所述的級聯納米酶的制備方法，其中，包括步驟：

提供鉑納米顆粒水溶液；

將第二配體和所述鉑納米顆粒水溶液進行混合；

加入金屬鹽和一氧化氮合成酶的混合水溶液，反應后得到所述級聯納米酶。

可選地，所述第二配體選自2-甲基咪唑、2-醛基咪唑中的一種或兩種，和/或，所述金屬鹽選自鋅鹽、鈷鹽、鋯鹽、銅鹽中的一種或多種。