[發明專利]一種從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法

在審

• 申請號: 202110645828.2
• 申請日: 2021-06-10
• 公開（公告）號: CN113318136A
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 張曉慶;焦巍;張千;金艷梅;塔娜;張繼澤
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院草原研究所
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185
• 代理公司: 北京清控智云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11919
• 代理人: 管士濤

本發明提供一種從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法，利用酶解處理技術結合低功率超聲波輔助提取技術，破壞蕁麻的植物組織，加速多酚類和黃酮類化合物的溶出，再利用超聲波輔助乙醇提取的方法實現多酚類和黃酮類化合物的充分提取，具有提取率高、提取時間短的效果。進同時，利用微濾、超濾和納濾技術分離多酚類和黃酮類化合物，并結合聚酰胺柱的吸附分離技術進一步純化多酚類和黃酮類化合物，獲得純度高的多酚類和黃酮類化合物。

技術領域

本發明屬于天然產物提取技術領域，特別涉及一種從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法。

背景技術

蕁麻的干燥全草在我國具有悠久用藥歷史，其在《益部方物略記》、《本草綱目》中均有記載，具有祛風通絡、活血止痛、平肝定驚等功效。近年來，國內外學者對不同品種蕁麻屬植物的化學成分進行了系統研究，發現其活性成分主要有黃酮類類、有機酸類、多酚類類、木脂素類、甾醇類、蛋白質、多糖及其他類化合物，尤其富含多酚類和黃酮類。

其中，植物黃酮類和多酚類類物質具有很高的生物活性，如黃酮類具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎等作用，多酚類具有預防治療血管疾病、抗腫瘤、抗骨質疏松、預防肥胖、糖尿病、防輻射等作用。多酚類物質通常為非黃酮類類物質，具體包含酚酸、香豆素、單寧酸等，黃酮類類物質通常包括黃酮類、黃酮類醇、黃烷醇、黃烷酮、花色素等。

傳統的天然植物中多酚類和黃酮類化合物的提取通常采用熱水提取、有機溶劑提取、微波輔助提取、超聲波輔助提取和超臨界流體提取等。然而，天然植物中多酚類和黃酮類類化合物的復雜性和結構的不穩定性增加了提取難度，熱水提取和有機溶劑提取存在效率低、污染大的問題，微波輔助和超聲波輔助提取存在降解多酚類和黃酮類化合物的風險，且操作具有一定的安全隱患，超臨界流體提取存在能耗高、成本高的不足。因此，發展高效、綠色、安全的多酚類和黃酮類類化合物的提取技術成為迫切需求。

與此同時，對于多酚類和黃酮類化合物的純化技術而言，通常采用機溶劑萃取、聚酰胺柱吸附、大孔樹脂吸附等方法，存在有機溶劑浪費，工藝繁瑣耗時，造成目標產物不可逆損失的問題。因此，開發一種簡單快速、綠色環保的從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法是本領域技術人員亟需解決的技術問題。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明提供一種從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法，利用酶解處理技術結合低功率超聲波輔助提取技術，破壞蕁麻的植物組織，加速多酚類和黃酮類化合物的溶出，再利用超聲波輔助乙醇提取的方法實現多酚類和黃酮類化合物的充分提取，具有提取率高、提取時間短的效果。進一步，利用微濾、超濾和納濾技術分離多酚類和黃酮類化合物，并結合聚酰胺柱的吸附分離技術進一步純化多酚類和黃酮類化合物，獲得純度高的多酚類和黃酮類化合物。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案，一種從蕁麻中同時純化多酚類和黃酮類化合物的方法，包括以下步驟：

(1)將蕁麻全草清洗晾干后粉碎，過80-120目標準篩，用脫脂劑加熱回流1-3h，過濾，取濾渣干燥備用；

(2)將步驟(1)得到的蕁麻濾渣浸泡于10-20倍重量的水中，調節pH值為3-5，加入0.5-2wt％的果膠酶，1-3wt％的纖維素酶和1-2wt％的木瓜蛋白酶，控制溫度為45-55℃，施加功率為200-300W的超聲波，處理30-50min；

(3)向步驟(2)的混合溶液中加入乙醇，調整乙醇濃度為65-75wt％，控制溫度為70-80℃，施加功率為1000-1200W的超聲波，處理60-80min；過濾得到過濾渣和過濾液；

(4)將步驟(3)得到的過濾液濃縮后高速離心取上清液，然后將上清液過孔徑為0.1-0.3μm的微濾膜除雜得到微濾液，繼續將微濾液過超濾膜除雜，超濾膜的截留分子量為2000-7000Da，得到超濾液，繼續將超濾液過納濾膜除雜，納濾膜的截留分子量為200-600Da，得到納濾液；