[發(fā)明專利]馬齒莧中四種木脂素及其提取分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110642561.1
• 申請日: 2021-06-09
• 公開（公告）號: CN113264829B
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設計）人: 張文潔;段陽;譚麗雙;李煥峰;英錫相
• 申請（專利權）人: 遼寧中醫(yī)藥大學
• 主分類號: C07C65/24
• 分類號: C07C65/24;C07C51/47;C07C51/43;C07C51/42;C07C43/23;C07C41/36;C07C41/40;C07C41/34;A61P29/00;A61P39/06;A61K31/192;A61K31/09;A23L33/105
• 代理公司: 沈陽亞泰專利商標代理有限公司 21107
• 代理人: 馬維駿

1.一種從馬齒莧藥材中分離出的木脂素類化合物的提取分離方法，其特征在于，所述提取分離方法的具體步驟包括：

步驟1：取馬齒莧干燥藥材，采用乙醇提取，放涼至室溫，得藥液備用；

步驟2：將步驟1中藥液蒸干后上硅膠柱，用乙酸乙酯洗脫，減壓回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯提取物；

步驟3：將步驟2中乙酸乙酯提取物經(jīng)聚酰胺柱分離，采用乙醇-水梯度洗脫，乙醇蒸干后上硅膠柱，用乙酸乙酯，乙酸乙酯-甲醇洗脫，回收乙酸乙酯至浸膏，得到乙酸乙酯提取物；

步驟4：將步驟3中所得物經(jīng)預處理的ODS柱層析分離，用甲醇-水梯度洗脫，得到若干洗脫部位，經(jīng)薄層色譜進行檢測，顯色，將各顯色的洗脫部位分別減壓濃縮至干，得到濃縮物備用；

步驟5：將步驟4中所得物經(jīng)HPLC分離制備，以乙腈-0.1%甲酸為流動相，檢測波長為210nm和280nm，經(jīng)薄層色譜進行檢測，顯色，最終得到所述的四種木脂素類化合物；

所述木脂素類化合物包括如下四種，其化學結構式如下：

分子式分別為C₁₈H₁₄O₆、C₁₉H₁₆O₇、C₁₈H₁₄O₆和C₁₈H₁₆O₄，并且根據(jù)結構命名為6,7-dihydroxy-4-(4''-hydroxy-3''-methoxyphenyl)-2-naphthoic acid（1）、6,7-dihydroxy-4-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-2-naphthoic acid（2）、4-(3,4-dihydroxyphenyl)-6-hydroxy-7-methoxy-2-naphthoic acid（3）和8-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxynaphthalen-2-ol（4）：

。

2.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟1中乙醇回流提取兩次，每次2小時，乙醇量為藥材的8倍～16倍。

3.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟2中所用乙酸乙酯洗脫為等度洗脫。

4.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟3中用體積比為70∶30、95∶5的水和乙醇梯度洗脫；所用乙酸乙酯洗脫為等度洗脫，用體積比為5∶1、2∶1的乙酸乙酯和甲醇梯度洗脫。

5.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟4中用體積比為60∶40、70∶30、80∶20、90∶10的甲醇和水梯度洗脫。

6.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟4中所用的ODS柱的預處理過程為甲醇浸泡過24小時，上柱，用甲醇洗至滴入水中無混濁，再以初始流動相平衡。

7.如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟5中以體積比分別為20∶80、19∶81、20∶80、40∶60的乙腈-0.1%甲酸為流動相等度洗脫，保留時間分別為11.27min得到化合物1、10.67min得到化合物2、11.63min得到化合物3、11.04min得到化合物4。