[發(fā)明專利]一類含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽的合成方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110632716.3
• 申請(qǐng)日: 2021-06-07
• 公開（公告）號(hào): CN113292508B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高長(zhǎng)波;王惠嘉;王慧;張忠旗;田吉偉;周玉玉;趙金禮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西慧康生物科技有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C07D241/08
• 分類號(hào): C07D241/08
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責(zé)任公司 61201
• 代理人: 高雪霞

本發(fā)明公開了一類含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽的合成方法，該方法是以Fmoc?L?Glu?OTrt或Fmoc?L?Asp?OTrt為起始原料，以其側(cè)鏈羧基連接固相載體RinkAmide AM Resin，以Fmoc?L?AA(X)?OH(AA指α?氨基酸，X為α?氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基)為連接的第二個(gè)氨基酸，完成連接后，用哌啶/DMF脫掉Fmoc保護(hù)基，用三氟乙醇/醋酸的DCM溶液脫掉羧基上的Trt保護(hù)基，讓羧基裸露出來，最后在PyBop、DIEA的DMF溶液中讓樹脂肽上裸露的氨基和羧基自行環(huán)合成環(huán)二肽并掛在樹脂上，經(jīng)過切割，使環(huán)二肽脫落下來，在乙醚中沉淀生成含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽。本發(fā)明合成方法簡(jiǎn)單、操作安全，易于純化，適合規(guī)模化操作，可批量合成含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于多肽合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一類含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽的合成方法。

背景技術(shù)

環(huán)二肽(cyclic dipeptides)，又名2,5-二酮哌嗪(2,5-diketopiperazines)，是一自然界中最小的環(huán)肽，這類化合物在人、脊椎動(dòng)物、無脊椎動(dòng)物、植物、真菌和細(xì)菌中均有發(fā)現(xiàn)。由于環(huán)二肽形成了一個(gè)穩(wěn)定的六元環(huán)結(jié)構(gòu)，具有一定的構(gòu)象約束作用。有兩個(gè)氫鍵給體和兩個(gè)氫鍵受體，氫鍵是藥物與受體相互作用的主要方式之一，因此環(huán)二肽在藥物化學(xué)中是一個(gè)重要的藥效團(tuán)。目前發(fā)現(xiàn)的一些環(huán)二肽具有抗病毒、抗菌、抗腫瘤等生物活性，因此環(huán)二肽及其衍生物常被作為候選物，一直受到合成化學(xué)家和生物學(xué)家及藥物學(xué)家的追捧。

L-天冬酰胺作為人體非必需的氨基酸，它廣泛分布在植物界，可以從蘆筍、甜菜根、豌豆、蠶豆中分離得到。作為一種藥物，天冬酰胺也常用于擴(kuò)張支氣管、平喘、抗消化性潰瘍及胃功能障礙的治療，在食品、醫(yī)藥、輕化工和水環(huán)保方面具有廣泛的用途。L-谷氨酰胺在體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成為糖胺，作為合成粘蛋白的前體，可促進(jìn)潰瘍愈合，主要用作消化道潰瘍藥。此外，還可用作腦功能改善劑和用于治療酒精中毒。當(dāng)前，有很多含有天冬酰胺、谷氨酰胺環(huán)二肽的合成及其生物活性報(bào)道。

含有天冬酰胺、谷氨酰胺的環(huán)二肽的合成方法有經(jīng)典液相合成法和固相合成法，其中液相合成法采取最大保護(hù)策略，從N端到C端合成，采取活潑酯法或?qū)ΨQ酸酐法，合成得到全保護(hù)二肽甲酯片段，氨酯交換環(huán)合，液相合成周期長(zhǎng)，且二肽甲酯片段需要柱層析；固相合成法包括直接縮合法和分子內(nèi)氨解法，分子內(nèi)氨解法多選用Oxime樹脂，以肟為L(zhǎng)inker的載體，形成羧酸肟酯，親核活性高，但樹脂昂貴，應(yīng)用較少；直接縮合法采取Fmoc/tBu/OAL正交策略或Fmoc/tBu/Dmab正交策略，合成線性二肽，脫除N端和C端保護(hù)，在固相載體上直接縮合得到目標(biāo)環(huán)肽。采用Fmoc/tBu/OAL正交策略，須使用高毒試劑3-溴丙烯，安全性低，且脫保護(hù)須使用過渡金屬催化劑鈀，對(duì)空氣敏感且價(jià)格昂貴，脫保護(hù)反應(yīng)的試劑殘留影響環(huán)合反應(yīng)的發(fā)生；采用Fmoc/tBu/Dmab正交策略，羧基保護(hù)基需使用2-{1-[4-(羥甲基)苯氨基]-3-甲基亞丁基}-5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮(Dmab-OH)，價(jià)格約2400元/g，價(jià)格昂貴，脫保護(hù)需使用水合肼，增加了合成步驟，故應(yīng)用較少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種合成工藝簡(jiǎn)單、成功率高、適用性廣、可批量化合成的含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽的方法。

本發(fā)明所述含天冬酰胺或谷氨酰胺的環(huán)二肽的結(jié)構(gòu)式為：

其中，式Ⅰ為含谷氨酰胺的環(huán)二肽，其分子通式為Cyclo(AA-Asn)，式Ⅱ?yàn)楹於０返沫h(huán)二肽，其分子通式為Cyclo(AA-Gln)，分子通式中AA代表α-氨基酸，式Ⅰ和式Ⅱ中R為α-氨基酸的側(cè)鏈，所述合成方法由下述步驟組成：