[發明專利]一種金龍膽草中的皂苷制備、檢測方法及應用

在審

• 申請號: 202110630552.0
• 申請日: 2021-06-07
• 公開（公告）號: CN113679748A
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 王莉;秦羅強;周利來;席文廷;田剛;代宏
• 申請（專利權）人: 重慶威迪特藥業有限責任公司;成都威迪特生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P1/04;A61P11/00;G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 成都誠中致達專利代理有限公司 51280
• 代理人: 吳飛

本發明公開了一種金龍膽草中的皂苷制備、檢測方法及應用，包括以下步驟：S1：將金龍膽草全草粉碎后，使用60%~85%的乙醇進行水浴加熱回流提取，得到金龍膽草料液；S2：趁熱過濾金龍膽草料液，并合并濾液，55℃~80℃減壓回收溶劑，至乙醇完全揮發，得到濃溶液；S3：使用蒸餾水、20%乙醇進行稀釋，得到濃度為15 g/100ml~30g/100ml的生藥；S4：使用離心機進行離心沉淀，取上清液；S5：將上清液過AB?8大孔樹脂柱，分別使用蒸餾水、70%乙醇進行梯度洗脫；S6：收集70%乙醇洗脫液，55℃~80℃減壓回收溶劑，干燥、粉碎后得到金龍膽草皂苷。不使用其他種類有機溶劑輔助，降低溶劑殘留與生產能耗，得到的金龍膽草皂苷純度較高。

技術領域

本發明涉及金龍膽草加工技術領域，尤其涉及一種金龍膽草中的皂苷制備、檢測方法及應用。

背景技術

金龍膽草是我國四川省的一種民間藥材，《中國藥典2020版》對其做出的定義為：菊科植物苦蒿的干燥地上部分；性狀為：莖呈圓柱形，少分枝，長30~100cm，直徑0.2~0.6cm;表面黃綠色或淺棕黃色，有縱棱和多數白色長絨毛；質硬而脆，易折斷；單葉互生，葉片多卷縮、破碎，完整者展平后呈羽狀深裂至全裂，裂片披針形，黃綠色，兩面密被白色絨毛；下部葉具柄，上部葉幾無柄；頭狀花序直徑約1cm，花黃白色；瘦果淺黃色，扁平，冠毛長5~6mm；氣微，味極苦。

現有技術中，金龍膽草的皂苷制備方法需要使用到除乙醇外其他種類的有機溶劑，造成的溶劑殘留與能耗會影響生產的企業成本與質量;且使用了不同濃度的高濃度乙醇進行提取，產品的工藝流程設計較為繁瑣，不利于工業化大生產與質量控制。另外金龍膽草的皂苷片生產工藝中使用浸漬法進行提取，酸堿沉淀法沉淀其他雜質得到金龍膽草總皂苷，可這種方法提取時提取率不高，純化需要使用大量酸堿所產生的廢液對于環境負擔大，廢水處理成本高，且得到的產物中總皂苷含量也不高。

發明內容

為解決現有技術不足，本發明提供一種金龍膽草中的皂苷制備、檢測方法及應用，不使用其他種類有機溶劑輔助，降低溶劑殘留與生產能耗；統一提取使用的乙醇濃度，簡化工藝步驟；安全系數更高，危害與毒性顯著性降低；得到的金龍膽草皂苷純度較高。

為了實現本發明的目的，擬采用以下方案：

一種金龍膽草中的皂苷制備方法，包括以下步驟：

S1：將金龍膽草全草粉碎后，使用60%~85%的乙醇進行水浴加熱回流提取，得到金龍膽草料液，其中，水浴加熱溫度70℃~90℃，提取時的料液比為1：6~1：10，提取三次，每次2h；

S2：趁熱過濾金龍膽草料液，并合并濾液，55℃~80℃減壓回收溶劑，至乙醇完全揮發，得到濃溶液；

S3：使用蒸餾水、20%乙醇進行稀釋，得到濃度為15 g /100ml ~30g/100ml的生藥；

S4：使用離心機進行離心沉淀，取上清液，其中，離心速度500 rpm ~800rpm，離心時間8min~15min；

S5：將上清液過AB-8大孔樹脂柱，分別使用蒸餾水、70%乙醇進行梯度洗脫；

S6：收集70%乙醇洗脫液，55℃~80℃減壓回收溶劑，干燥、粉碎后得到金龍膽草皂苷。

進一步的，步驟S1中：使用80%的乙醇水浴加熱回流提取，提取時的料液比為1：8，水浴加熱溫度80℃。

進一步的，步驟S2和S6中：60℃減壓回收溶劑。

進一步的，步驟S4中：離心速度600 rpm，離心時間12min。

一種金龍膽草中的皂苷檢測方法，利用所述檢測方法檢測上述所述的金龍膽草中的皂苷制備方法制得的金龍膽草皂苷，檢測方法包括利用齊墩果酸作為對照品，香草醛-乙醇-硫酸法顯色檢測所述金龍膽草皂苷中的皂苷含量、出膏率。

進一步的，皂苷含量在60%~80%，出膏率1.5%~3.0%。