[發(fā)明專利]一種穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110627158.1
• 申請日: 2021-06-04
• 公開（公告）號: CN113475316B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李俊;官純麗;王紹柏
• 申請（專利權(quán)）人: 李俊
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14
• 代理公司: 宜昌市慧宜專利商標代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42226
• 代理人: 彭婭

本發(fā)明涉及一種穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種的制備方法，生產(chǎn)上的兩個主打蜜環(huán)菌栽培出子實體，用組織分離純化得到兩個菌種，編號為M1，M2；用三角瓶制備好液體培養(yǎng)基，把M1，M2同時接入其中，在22～23°C，以150r/min振蕩培養(yǎng)140h時，得到菌絲球密度在80～90%的菌種；再把此菌種接入到發(fā)酵罐，置于24～25°C，氣壓0.05mpa，培養(yǎng)145h左右時備用；在制備好的固體培養(yǎng)基中，以一瓶5ml的量接入發(fā)酵罐中的菌種，置于18～21°C，通風，避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿袋后，用于發(fā)蜜環(huán)菌材或三下窩栽培有性天麻種。本發(fā)明充分利用兩個不同菌株的生物在一起生長和生活，有相互促進和競爭關(guān)系。菌種以最快速度“鉆入”菌材中，最大程度的分解和合成菌材上的營養(yǎng)物質(zhì)，輸送和供給天麻生長。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蜜環(huán)菌培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種的制備方法。

背景技術(shù)

蜜環(huán)菌(Armillariellamellea)?是真菌界、擔子菌門、層菌綱、傘菌目、白磨科、小蜜環(huán)菌屬的一種食藥用真菌。蜜環(huán)菌在自然界中與天麻、豬苓等生物相互作用和協(xié)同進化有著密切的關(guān)系。在天麻、豬苓栽培中，蜜環(huán)菌種的活性或是優(yōu)劣，直接影響或是決定著它們的產(chǎn)量和質(zhì)量。

目前我國栽培天麻的蜜環(huán)菌種用量較大，僅湖北宜昌市的年產(chǎn)量為1500萬瓶（袋），可種植天麻750萬平方米，產(chǎn)值7.5億之多。而現(xiàn)在全國生產(chǎn)蜜環(huán)菌種的原種配方均為固體基質(zhì)菌種，即用鋸木屑，棉籽殼，玉米等物質(zhì)培養(yǎng)的。只有極少量（1%左右）的菌種廠家生產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種替代固體原種擴接栽培種。

在大面積的用蜜環(huán)菌種發(fā)蜜環(huán)菌材的過程中，約有10～15%的量，因兩個原因?qū)е绿炻樵耘嗍』驌p失。一是有些廠家生產(chǎn)的蜜環(huán)菌種本身存在質(zhì)量上的問題；二是品種單一。在生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，相當一部分麻農(nóng)在培養(yǎng)蜜環(huán)菌材時，為了避免因一個菌種廠的質(zhì)量問題，或是用一個蜜環(huán)菌種單一的問題，而使發(fā)菌材失敗。

蜜環(huán)菌種用于栽培天麻的過程中，為了保證產(chǎn)量和穩(wěn)定的質(zhì)量，但是也出現(xiàn)了以下問題：

一是僅用一種蜜環(huán)菌種有時會出現(xiàn)兩種現(xiàn)象，一種若是菌種“質(zhì)量”有問題，如活力不強或?qū)μ炻橛H和力不強，對菌材“分解”力差，導致供給天麻的營養(yǎng)不充足，而影響天麻的產(chǎn)量。另一種是一個蜜環(huán)菌種由于本身的自然屬性，即具有一定的地域適應(yīng)特點，在此地生長的好，在彼地可能生長的差。只用一種蜜環(huán)菌發(fā)菌材有一定的局限性。因此，在一個栽培窩，同時用兩種不同來源的蜜環(huán)菌種發(fā)菌材，兩個菌種“爭先恐后”的去分解菌材上的營養(yǎng)物質(zhì)，又“爭先恐后”的給天麻輸送供給營養(yǎng)物質(zhì)，因而能穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的提高天麻的產(chǎn)量。

二是固體菌種能混合播種到同一栽培窩中，幾個菌種或是菌株在同一菌材上有幾個分布點，彼此不貼近，距離約隔10～15cm，在開始生長時“不打架”，即不發(fā)生頡頏現(xiàn)象。至于兩個菌株生長出的菌絲體至相互接觸時的情況怎樣，還需要解剖觀察去定論。但此種方法較麻煩，既不省工、省力，又不均勻。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是一種穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種的制備方法，均能獲得穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的效果。將兩個不同的蜜環(huán)菌株接種到同一培養(yǎng)基中，去培養(yǎng)菌材，這兩種菌種以菌絲體的形態(tài)“鉆入”到木材中去，又以菌索的形態(tài)“鉆入”到天麻麻體中，把菌材上的營養(yǎng)分解、合成、輸送到天麻中供給其生長發(fā)育成白、米麻和箭麻。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

一種穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)液體蜜環(huán)菌種的制備方法，所述方法包括以下步驟：

1）將不同菌種的蜜環(huán)菌菌種接入液體培養(yǎng)基中進行液體培養(yǎng)，得到菌絲球體積占比在80～90%的混合菌種；

3）把步驟1）得到的混合菌種接入到發(fā)酵罐中進行擴大培養(yǎng)，得到擴大后的混合菌種；

3）在固體栽培種培養(yǎng)基中，接入擴大后的混合菌種，培養(yǎng)，待菌絲體長滿袋后，用于發(fā)蜜環(huán)菌材或三下窩栽培有性天麻種。