[發明專利]一種羽葉丁香倍半萜合酶及其應用

在審

• 申請號: 202110624930.4
• 申請日: 2021-06-04
• 公開（公告）號: CN115433728A
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 劉娟;高佳琪;蔣超;黃璐琦
• 申請（專利權）人: 中國中醫科學院中藥研究所
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12N15/60;C12P5/00;C12P7/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.蛋白質的下述任一種應用：

P1、所述蛋白質在生產山沉香倍半萜中的應用，

P2、所述蛋白質在制備生產山沉香倍半萜產品中的應用；

所述蛋白質是如下A1)、A2)、A3)或A4)的蛋白質：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白質，

A2)氨基酸序列是序列表中序列3的的蛋白質，

A3)在A1)或A2)所示的蛋白質的羧基端或/和氨基端融合蛋白標簽得到的融合蛋白，

A4)將序列表中序列1所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的與A1)或A2)所示的蛋白質具有80％以上的同一性的蛋白質。

2.蛋白質在作為山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶或在制備反式橙花叔醇中的應用，所述蛋白質為權利要求1中所述的蛋白質。

3.與權利要求1中所述的蛋白質相關的生物材料的下述任一種應用：

F1、所述生物材料在生產山沉香倍半萜中的應用，

F2、所述生物材料在制備生產山沉香倍半萜產品中的應用；

所述生物材料為下述D1)至D6)中的任一種：

D1)編碼權利要求1中所述蛋白質的核酸分子；

D2)含有D1)所述核酸分子的表達盒；

D3)含有D1)所述核酸分子的重組載體、或含有D2)所述表達盒的重組載體；

D4)含有D1)所述核酸分子的重組微生物、或含有D2)所述表達盒的重組微生物、或含有D3)所述重組載體的重組微生物；

D5)促進或提高權利要求1中所述蛋白質表達的核酸分子；

D6)含有D5)所述核酸分子的表達盒、重組載體或重組微生物。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：D1)所述核酸分子為如下d1)、d2)或d3)所示的所述蛋白質的編碼基因：

d1)編碼序列是序列表中序列2的cDNA分子或DNA分子；

d2)核苷酸是序列表中序列4的cDNA分子或DNA分子，

d3)與d1)或d2)限定的cDNA或DNA分子雜交且編碼具有相同功能的蛋白質的cDNA分子或DNA分子。

5.權利要求1中所述的蛋白質和/或權利要求3或4中所述的生物材料。

6.一種制備山沉香倍半萜反式橙花叔醇的方法，包括如下步驟：將權利要求1中所述蛋白質作為山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶對底物法尼焦磷酸銨鹽FPP進行催化，得到所述山沉香倍半萜反式橙花叔醇。

7.一種制備山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶的方法，包括如下步驟：將權利要求1中所述蛋白質的編碼基因在原核微生物中進行表達得到所述山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述將權利要求1中所述蛋白質的編碼基因在原核微生物中進行表達包括將權利要求1中所述蛋白質的編碼基因導入受體微生物，得到表達所述山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶的重組微生物，培養所述重組微生物，表達得到所述山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶。

9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述表達為誘導表達。

10.含有權利要求1中所述的蛋白質和/或權利要求3或4中所述的生物材料的下述任一種產品：

H1、生產山沉香倍半萜的產品；

H2、生產山沉香倍半萜反式橙花叔醇的產品；

H3、制備生產山沉香倍半萜的產品；

H4、生產山沉香倍半萜反式橙花叔醇合酶的產品。