[發明專利]一種分子、表達其的細胞及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110620458.7
• 申請日: 2017-06-16
• 公開（公告）號: CN113512126B
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 請求不公布姓名
• 申請（專利權）人: 深圳市體內生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明提供了一種分子、表達其的細胞及其制備方法和用途。所述分子為嵌合的免疫抑制檢查點受體分子，包含胞外結構域、跨膜結構域和胞內結構域，所述胞外結構域和跨膜結構域為免疫抑制檢查點受體分子的相應結構域或基于該結構域進行基因改造后的結構域，所述胞內結構域包括至少一個免疫激活信號結構域。利用所述嵌合的免疫抑制檢查點受體分子制備的細胞具有強腫瘤殺傷作用，且可解除腫瘤免疫抑制微環境，增強腫瘤微環境中的免疫作用；并且，該轉化的細胞有自調節功能，可緩解過度的非特異免疫效應和細胞因子風暴等副作用。

本申請是名稱為：一種分子、表達其的細胞及其制備方法和用途，申請號為201780000466.3的發明專利的分案申請，母案申請日為2017年06月16日。

技術領域

本發明屬于腫瘤的細胞免疫治療技術領域，具體涉及一種分子、表達其的細胞及其制備方法和用途，尤其涉及一種嵌合的免疫抑制檢查點受體分子、編碼其的核酸、含有該核酸的構建體、表達載體和轉化的細胞以及相關制藥用途。

背景技術

目前，免疫療法已然成為人類對抗癌癥新的希望，而CAR-T治療血液腫瘤特別是B-ALL白血病的臨床試驗結果，使其成為了近年來最備受矚目的腫瘤免疫療法之一。然而，靶向實體瘤的CAR?T免疫治療研究仍然面對巨大的考驗：如何突破實體瘤組織壁壘、如何抵抗腫瘤組織內的免疫抑制、免疫細胞如何在缺氧微環境中競爭生存等。

腫瘤微環境可下調腫瘤抗原特異性的輔助/毒性殺傷細胞的數量和炎癥因子的釋放，上調免疫抑制細胞數量和抑制功能，如調節性T細胞(Regulatory?T?cells)和髓系來源的抑制細胞(Myeloid-Derived?Suppressor?Cells)，將正常免疫系統顛覆為促進腫瘤自身生長的優勢因素。

針對實體瘤免疫抑制的情況，科學家陸續研發出阻斷抑制信號通路，下調腫瘤微環境中的抑制性細胞的方法，如特異性靶向PD-L1(Programmed?Death?Ligand?1)、CTLA4(Cytotoxic?T-Lymphocyte-associatedAntigen-4)抗體或抑制劑，免疫激活因子等。

在現有技術中，將免疫抑制相關抗原CTLA-4應用于腫瘤免疫治療的手段通常是構建CTLA-4抗體(Ipilimumab)，或者使用CTLA-4的抑制劑或信號通路阻斷劑。然而，CTLA-4抗體存在一定的限制性，即，抗體需要滲入腫瘤組織中才可發揮療效，所以抗體的臨床應用具有不確定性。據報道，共表達靶向腫瘤相關抗原CAR?T和抑制性CAR?T(胞外抗原為正常細胞抗原，胞內段為CTLA-4的抑制信號域)，可防止CAR?T脫靶現象的發生(脫靶現象：CAR?T細胞識別殺傷正常細胞)。

另外，現有技術中還報道了共表達雙抗體PD-1(Programmed?Death?1)和CD19/Mesothelin/PSCA的CAR?T，這雖然擴大了靶點范圍(表達PD-1或CD19/Mesothelin/PSCA或同時表達兩者的腫瘤細胞)，但是忽略了盲目增加細胞殺傷作用所引起的副作用：細胞因子風暴、脫靶現象(正常細胞也表達兩個抗原或之一，導致CAR?T殺傷正常細胞，引起正常細胞缺失的機體功能缺陷)。

因此，提供一種具有較強的腫瘤殺傷作用、還能夠緩解非特異免疫效應和細胞因子風暴等副作用CAR?T細胞，對于本領域而言具有重要意義。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種分子、表達其的細胞及其制備方法和用途，具體包括嵌合的免疫抑制檢查點受體分子、編碼其的核酸，含有該核酸的構建體、表達載體和轉化的細胞，以及它們的制藥用途。本發明的表達所述嵌合的免疫抑制檢查點受體分子的轉化的細胞可營造一種腫瘤免疫抑制微環境，具有增強的腫瘤殺傷作用；并且，該轉化的細胞有自調節功能，可緩解過度的非特異免疫效應和細胞因子風暴等副作用。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：