[發明專利]一種檢測杧果細菌性角斑病菌的引物組及方法和應用有效
| 申請號： | 202110609320.7 | 申請日： | 2021-06-01 |
| 公開（公告）號： | CN113337625B | 公開（公告）日： | 2022-08-09 |
| 發明（設計）人： | 姜偉;覃梅靜;別鳳枝;何勇強;唐紀良 | 申請（專利權）人： | 廣西大學 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/64 |
| 代理公司： | 成都知棋知識產權代理事務所(普通合伙) 51325 | 代理人： | 馬超前 |
| 地址： | 530004 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 細菌性 角斑病 引物 方法 應用 | ||
1.一種檢測杧果細菌性角斑病菌的引物組，其特征在于，包括引物對XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR，其核苷酸序列分別如SEQ ID NO.1～2、SEQ ID NO.3～4和SEQ ID NO.5～6所示。
2.一種檢測杧果細菌性角斑病菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)提取待檢測樣品的總DNA；
2)以待檢測樣品總DNA為模板，利用引物對XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR分別進行PCR擴增；所述引物對XcmU1-FR、XcmU2-FR和XcmU3-FR核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1～2、SEQ ID NO.3～4和SEQ ID NO.5～6所示；
3)擴增產物進行凝膠電泳，依據凝膠電泳結果進行判斷：若能擴增出大小分別為297bp、237bp和357bp的產物中的任意一條或多條產物，則認為該樣品中存在杧果細菌性角斑病菌。
3.根據權利要求2所述的一種檢測杧果細菌性角斑病菌的方法，其特征在于，所述的PCR擴增體系為：待檢測樣品總DNA 1～3μL，引物各0.2μL，10mM dNTPs 0.2μL，EasyTaq DNAPolymerase 0.2μL，10×EasyTaq Buffer 2.0μL，ddH2O 14.2～16.2μL，總體系為20μL。
4.根據權利要求2所述的一種檢測杧果細菌性角斑病菌的方法，其特征在于，所述的PCR擴增程序為：95℃8min；95℃30s，60℃30s，72℃30s，30個循環；72℃10min。
5.權利要求1所述的引物組在檢測杧果細菌性角斑病菌中的應用。
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