[發明專利]黃曲霉毒素風險預警智能感知卡及其應用

有效

• 申請號: 202110609138.1
• 申請日: 2021-06-01
• 公開（公告）號: CN113484512B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 張奇;白藝珍;唐曉倩;李慧;李培武
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院油料作物研究所
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 喬宇

1.?黃曲霉毒素風險預警智能感知卡，其特征在于：包括黃曲霉毒素預警分子納米抗體或黃曲霉毒素預警分子單克隆抗體、信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體、樣品墊、硝酸纖維素膜、吸水墊、底板、羊抗兔抗體，底板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，所述檢測墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上自上而下設置橫向質控線和檢測線，所述的質控線上包被有羊抗兔抗體，所述的檢測線上包被有黃曲霉毒素預警分子納米抗體或者黃曲霉毒素預警分子單克隆抗體，所述的信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體裝載在樣品墊上，或者單獨裝載，所述的黃曲霉毒素預警分子是指AFT-YJFZ01肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1?所示。

2.根據權利要求1所述的黃曲霉毒素風險預警智能感知卡，其特征在于：所述的信號材料是指常規的銪乳膠微球或金納米顆粒。

3.根據權利要求1所述的黃曲霉毒素風險預警智能感知卡，其特征在于：所述的信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體，是指信號材料通過常規標記方法與黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體發生偶聯以后的產物。

4.權利要求1所述的黃曲霉毒素風險預警智能感知卡的用途，其特征在于：用于快速感知曲霉屬菌株產黃曲霉毒素能力，或鑒別樣品中是否存在強產毒力的黃曲霉毒素產毒菌株，或智能感知農產品中黃曲霉毒素污染風險水平。

5.根據權利要求4所述的用途，其特征在于：應用方法為：用常規察氏培養基培養并制備待鑒別菌株或待鑒別樣品的待測液，然后即可用黃曲霉毒素風險預警智能感知卡測定黃曲霉毒素預警分子AFT-YJFZ01含量，具體方法為：樣品墊上裝載有信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體時，將待鑒菌株或待鑒別樣品的待測液或農產品樣品的待測液加到黃曲霉毒素風險預警智能感知卡的樣品墊上，反應一段時間，讀取分析結果；

樣品墊上沒有裝載信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體時，將待鑒菌株或待鑒別樣品的待測液或農產品樣品的待測液加到信號材料標記的黃曲霉毒素預警分子兔多克隆抗體中，然后將黃曲霉毒素風險預警智能感知卡插入待鑒菌株或待鑒別樣品的待測液或農產品樣品的待測液中，反應一段時間，讀取分析結果。

6.根據權利要求4所述的用途，其特征在于：應用方法還包括：檢測結果評判：根據黃曲霉毒素風險預警智能感知卡測定結果，獲得單位體積菌株待測液中黃曲霉毒素預警分子AFT-YJFZ01的含量，分析待鑒別菌株的黃曲霉毒素產毒力，待鑒別菌株中黃曲霉毒素預警分子AFT-YJFZ01濃度越高，則說明鑒別菌株產黃曲霉毒素能力即產毒力越強；

根據黃曲霉毒素風險預警智能感知卡測定結果，獲得單位體積待鑒別樣品液中黃曲霉毒素預警分子AFT-YJFZ01的含量，判定待鑒別樣品中是否含有黃曲霉毒素的強產毒力菌株；

根據黃曲霉毒素風險預警智能感知卡測定結果，獲得單位體積農產品樣品的待測液中黃曲霉毒素預警分子AFT-YJFZ01的含量，預測農產品中黃曲霉毒素污染風險。

7.?根據權利要求4所述的用途，其特征在于：待鑒別菌株的待測液的制備：待鑒別菌株培養，稀釋，獲得待鑒別菌株的待測液；具體為：將待鑒別菌株在常規察氏培養基或者其他適宜菌株生長的培養基培養，培養的環境溫度為15?~?35?℃，培養時間不少于12?h后，取培養基與培養物的混合體充分勻漿，再用無菌水稀釋1-10倍，獲得待鑒別菌株的待測液；

待鑒別樣品液的制備：待鑒別樣品培養，獲得待鑒別樣品的待測液；具體為：稱量待鑒別樣品，轉移至無菌水中，室溫震蕩至均勻，制成待測樣品稀釋液，取?10-1000?μL樣品稀釋液加在含6-600?mL常規沙氏液體培養基中，置于15-35°C下200±50?rpm震蕩培養，培養6-24?h后取樣，形成待鑒別樣品的待測液。

8.根據權利要求4所述的用途，其特征在于：所述樣品為農田、農產品、中藥材或飼料。