[發明專利]一種野生苦味枸杞的鑒別方法在審
| 申請號： | 202110607992.4 | 申請日： | 2021-06-01 |
| 公開（公告）號： | CN113293224A | 公開（公告）日： | 2021-08-24 |
| 發明（設計）人： | 袁海靜;陳雨;袁漢民;馮旭;袁海燕;董立國;趙興增;彭健;印敏;劉蘭英;何進尚;張維軍;王毅;劉揚 | 申請（專利權）人： | 寧夏農林科學院;江蘇省中國科學院植物研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/02 |
| 代理公司： | 北京世譽鑫誠專利代理有限公司 11368 | 代理人： | 任欣生 |
| 地址： | 750000 寧夏回族*** | 國省代碼： | 寧夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 野生 苦味 枸杞 鑒別方法 | ||
1.一種野生苦味枸杞的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：
通過栽培甜味枸杞與待檢測的野生枸杞分別正交和反交，當以甜味枸杞做母本與野生枸杞雜交，所得到的F1代成熟漿果個數出現苦味枸杞、甜味枸杞的分離比例接近1:1時，且其反交F1代成熟漿果均為苦味枸杞，則該待檢測的野生枸杞為苦味枸杞。
2.一種野生苦味枸杞的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：
將待檢測苦味枸杞的苦味基因連鎖的InDel標記，InDel標記由BID165引物組擴增，
BID165上游引物：5’-ACCTCTGTGGCCGTAAGCTA-3’；
BID165下游引物：5’-CCTCTACTTCAACAGGGTAAGAAA-3’。
3.如權利要求2所述的一種野生苦味枸杞的鑒別方法，其特征在于，待檢測苦味枸杞的苦味基因連鎖的InDel標記由BID165引物組擴增的步驟如下：
取枸杞漿果150g，液氮研磨成粉末，用總DNA提取試劑盒提取其DNA，BID165引物組的PCR反映程序為：
94℃預變性5min；
94℃變性50s，58℃退火40s；
72℃延伸45s，循環39次；
72℃延伸8min，4℃保存，反應產物經8％的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳。
4.如權利要求3所述的一種野生苦味枸杞的鑒別方法，其特征在于，擴增后進行銀染檢測，干燥后掃描記錄結果。
5.如權利要求4所述的一種野生苦味枸杞的鑒別方法，其特征在于，野生枸杞苦味鑒別分析：在111～147bp之間，若待檢測的野生枸杞DNA泳帶擴增出了高于其他甜味枸杞的條帶，則該待檢測的野生枸杞為苦味枸杞。
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