[發(fā)明專利]一種引發(fā)溶血性輸血反應和嚴重新生兒溶血病的RHCE血型基因的SNP位點

有效

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• 申請日: 2021-06-01
• 公開（公告）號: CN113249466B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設計）人: 張少強;王海燕;劉青;馮智慧
• 申請（專利權）人: 青島大學附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京識然知識產權代理事務所(普通合伙) 11975
• 代理人: 曾慶國

本發(fā)明的目的是提供一種用于檢測RhCE血型系統(tǒng)變異型基因引發(fā)的溶血性輸血反應及嚴重新生兒溶血病的SNP位點，在Intron6末端靠近Exon7剪切位點存在940?3CG的純合突變，造成了該RHCE基因Exon7?Exon10無法正確剪切，從而影響RhC、c、E和e四個抗原在紅細胞表面的表達。本發(fā)明提供了RHCE變異型基因的新的用途，從而提供了一種有效的針對輸血引發(fā)的溶血性輸血反應及嚴重新生兒溶血病的快速基因診斷、基因篩查及遺傳咨詢的途徑，應用效果表明本發(fā)明所提供的基因的SNP位點及檢測引物可以有效的用于臨床輸血患者及孕產婦外周血進行新的RHCE變異型基因突變位點的快速檢測。

技術領域

本發(fā)明屬于基因診斷制品技術領域，具體涉及一種引發(fā)溶血性輸血反應和嚴重新生兒溶血病的RHCE血型基因的SNP位點。

背景技術

2021年2月，ISBT又確認43個的紅細胞血型系統(tǒng)，共343個抗原。其中Rh血型是最復雜的血型系統(tǒng)。RHD、RHCE是Rh血型最重要的兩個基因，兩個基因共編碼55個抗原，在臨床輸血中的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)。

Rh血型抗原對于臨床輸血意義最大的主要有5個，即RhD、C、c、E和e抗原，其中針對臨床輸血患者和無償獻血者D抗原檢測均為必檢項目，有條件的實驗室還開展開了RhD陰性抗原的確證實驗。

臨床上對RhD抗原引起的免疫性輸血反應和新生兒溶血病的成功預防，使人們開始關注紅細胞上的其他Rh抗原，尤其是與RhD緊密相關的RhCE抗原。臨床檢出的不則規(guī)抗體中，Rh血型系統(tǒng)抗體約占80％，其中抗-E、抗-E合并-c占到約50％，抗體頻率依次為抗-E、抗-E合并抗-c、抗-C合并抗-e、抗-C、抗-c、和抗-e。

目前法規(guī)未規(guī)定醫(yī)療機構開展RhC、c、E和e抗原的檢測，在需反復輸血的患者，如地中海貧血患者、血液系統(tǒng)疾病患者、器官和組織移植患者、慢性消化道出血患者、腎病患者和腫瘤患者、育齡女性、孕產婦在臨床輸血過程中容易收到免疫刺激，產生抗-C、抗-e、抗-E、抗-c抗體，因此開展Rh血型相容性輸血具有重要意義。

為了進一步提高輸血安全、加強預防輸血引發(fā)的溶血性輸血反應和胎兒新生兒溶血病(HDFN)，申請人所在的輸血科發(fā)現(xiàn)的先證者，并委托青島市中心血站輸血研究所進行研究，發(fā)現(xiàn)了帶有可引發(fā)溶血性輸血反應和嚴重新生兒溶血病的RHCE血型基因的SNP位點，并建立了RHCE血型基因全外顯子的測序方法，從而促成了本發(fā)明。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種引發(fā)溶血性輸血反應和嚴重新生兒溶血病的RHCE血型基因的SNP位點，即一種RhCE血型系統(tǒng)變異型血型基因引發(fā)的溶血性輸血反應及嚴重新生兒溶血病(HDFN)的SNP位點，該位點位于Exon7剪切區(qū)域。

申請人對一個1號染色體P36.2-P34顯性遺傳的RHCE血型基因變異的先證者進行了測序，找到了該先證者RHCE變異型基因存在遺傳上的致病突變，由于在Intron6末端靠近Exon7剪切位點存在nt940-3CG的純合突變，造成了該RHCE基因Exon7-Exon10無法正確剪切，從而影響RhC、c、E和e四個抗原在紅細胞表面的表達。

本發(fā)明首先提供一種引發(fā)溶血性輸血反應和嚴重新生兒溶血病的RHCE血型基因的SNP位點，所述的SNP位點位于序列為SEQ ID NO：1的核酸片段的第170位，發(fā)生CG的突變；即RHCE血型基因編碼區(qū)域由起始密碼子起至第940位堿基(Exon7第1個堿基)上游第3個堿基發(fā)生了CG的突變；

其中SEQ ID NO：1的具體序列信息如下：