[發明專利]一種用于防治辣椒立枯病的復合微生物菌劑

有效

• 申請號: 202110604987.8
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113234635B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發明（設計）人: 展彬;王金濤;周自強;杜紹國
• 申請（專利權）人: 元和生物科技(德州)有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;A01N63/38;A01N63/28;A01N63/27;A01P3/00;A01P21/00;C09K17/14;C12R1/465;C12R1/885;C12R1/40;C09K101/00
• 代理公司: 濟南竹森知識產權代理事務所(普通合伙) 37270
• 代理人: 朱家富

1.一種用于防治辣椒立枯病的復合微生物菌劑，其特征在于，所述菌劑包含婁徹氏鏈霉菌ACCC19748、長枝木霉ACCC32522和惡臭假單胞菌ACCC BCBKL 0060；

所述復合微生物菌劑，按重量份計包括婁徹氏鏈霉菌20～30份、長枝木霉20～30份、惡臭假單胞菌10～20份；

所述復合微生物菌劑每克含有有效活菌數≥35億個。

2.如權利要求1所述的復合微生物菌劑，其特征在于，所述婁徹氏鏈霉菌、長枝木霉、惡臭假單胞菌的質量比為20:20:20。

3.權利要求1-2任一項所述的復合微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將婁徹氏鏈霉菌ACCC19748接種于改良高氏一號固體養基，在25～35℃條件下培養36～48h，加入無菌水調整孢子濃度到10⁸個/mL，然后按5~10 wt %接種于固體發酵培養基A中，在25～38℃培養4～6天，制得含有婁徹氏鏈霉菌ACCC19748有效活菌數20～50億/g的固體菌劑A；

（2）將長枝木霉ACCC32522接種于PDA固體培養基，在30～35℃條件下固體培養30～50h，加入無菌水調整孢子濃度到10⁸個/mL，然后按7~15wt%的接種量將長枝木霉接種于固體培養基B中，在25～35℃培養5~7天，制得含有長枝木霉ACCC32522有效活菌數10～30億/g的固體菌劑B；

（3）將惡臭假單胞菌ACCC BCBKL 0060接種于LB液體培養基，在25～30℃條件下，經搖瓶培養24～36h，制得液體種子，將制得的液體種子按體積分數5%~10%接種于液體發酵培養基C中，調控pH值至6.5～7.5、通氣比為1:(0.5～1)、轉速150～250轉/分，在23～33℃培養24～36h，制得菌液，將菌液與麥飯石按質量比1:1混合閃蒸干燥制得含有惡臭假單胞菌ACCC BCBKL 0060有效活菌數50～80億/g的固體菌劑C，所述麥飯石的目數為400-600目；

（4）將固體菌劑A、固體菌劑B和固體菌劑C混合均勻，制得復合微生物菌劑；

所述步驟（1）中的固體培養基A的重量組份包括如下：

蘆葦末400～600份，馬鈴薯粉100～300份，豆餅粉400～700份，葡萄糖200～300份，甘油20～50份，磷酸二氫鉀5～10份，MgSO₄·7H₂O 4～6份，水800～1000份，pH 5.5~6.5；

所述步驟（2）中的固體培養基B的重量組份包括如下：

麩皮粉200～400份，玉米面500～700份，稻殼粉200～300份，牛糞100～200份，蛭石200～300份，過磷酸鈣10～15份，水1000～1700份，pH 6.0~6.5；

所述步驟（3）中的液體培養基C的每升組分如下：

玉米粉10～15g，葡萄糖5～10g，海藻粉 5～10g，魚粉 10～15g，氯化鈉5～10g，硫酸鎂0.1～0.25g，硫酸錳0.1～0.25g，硝酸鉀1～2g，硫酸亞鐵0.1～0.2g，碳酸鈣0.5～1g余量水，調整pH值6.5～7.5。

4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（4）中，按重量份計將固體菌劑A 20～30份、固體菌劑B 20～30份和固體菌劑C 10～20份混合均勻，制得復合微生物菌劑。

5.如權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（4）中，按重量份計將固體菌劑A 20份、固體菌劑B 20份和固體菌劑C 20份混合均勻，制得復合微生物菌劑。

6.權利要求1-2任一項所述復合微生物菌劑應用于防治辣椒立枯病和/或增加辣椒的產量。