[發明專利]一種提升長雙歧桿菌增殖效率的肽及其應用

在審

• 申請號: 202110600881.0
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113186148A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 崔樹茂;毛丙永;唐鑫;汪文麗;趙建新
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/20;C12P21/06;C07K14/47;C07K1/14;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/36;C12R1/01
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 彭素琴

本發明公開了一種提升長雙歧桿菌增殖效率的肽及其應用，屬于微生物技術領域。本發明為解決因氮源利用率低影響長雙歧桿菌增殖的問題，提供了一種提升長雙歧桿菌增殖效率的方法，該方法以分子量為1500～2000Da、富含脯氨酸的親水性肽作為培養基的氮源培養長雙歧桿菌。利用該方法培養長雙歧桿菌，4g/L氮源培養濃度下發酵液OD₆₀₀高于2.5，為其他氮源的1.8～2.5倍，代時小于2.1h，氮源利用率高于35％。該方法在實現高效促進菌株生長的同時，顯著提高氮源利用效率，有效減少氮源的浪費。

技術領域

本發明涉及一種提升長雙歧桿菌增殖效率的肽及其應用，本發明屬于微生物技術領域。

背景技術

雙歧桿菌(Bifidobacteria)是存在于人和動物腸道中的益生菌，是腸道正常菌群之一，同時也是影響消化道生理環境的生理性細菌，目前已確定的雙歧桿菌具有抗癌、免疫調節、防止便秘等功效，鑒于其具有上述有效的益生功能，雙歧桿菌也越來越成為人們研究、開發、生產的重點，也被逐漸應用到益生菌乳制品生產中。但是目前商業化應用的雙歧桿菌菌株種類較少，主要在于雙歧桿菌的制備非常困難，氮源是制約其有效增殖的關鍵因素之一。

目前，國內外對于長雙歧桿菌的培養優化，主要是通過單因素試驗和正交試驗篩選優質的氮源，主要包括酵母浸粉、大豆蛋白胨、胰蛋白胨、魚骨蛋白胨等多種氮源。但是前期研究發現，即使是具有有效促生長活性的酵母提取物氮源，即使添加0.25％的酵母提取物也不會刺激長雙歧桿菌ATCC 15708的生長。此外，這類方法確定的氮源的添加量往往是過量的，生長過程中，培養基中會殘留大量未被利用的肽和氨基酸，利用效率低，不僅會提高發酵液的滲透壓從而抑制菌株的增殖，也會造成氮源的浪費。

基于現有技術中缺少適用于長雙歧桿菌高效增殖的氮源，以提高在長雙歧桿菌生長過程中的氮源的利用率，因此，找到一種適宜長雙歧桿菌高效增值的氮源對于長雙歧桿菌商業化應用變得尤為重要。

發明內容

本發明針對長雙歧桿菌培養過程中因氮源利用率低影響長雙歧桿菌增殖的問題，提供了一種提升長雙歧桿菌增殖效率的方法，所述方法用脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的親水性肽培養長雙歧桿菌。

在本發明的一種實施方式中，所述脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的親水性肽作為培養基的氮源。

在本發明的一種實施方式中，所述培養基的成分還含有葡萄糖、無水乙酸鈉、KH₂PO₄、K₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O、FeSO₄、檸檬酸氫二銨、吐溫、半胱氨酸鹽酸鹽、CaCl₂、酵母浸出粉、胡蘿卜汁。

本發明還提供了一種提升長雙歧桿菌氮源利用率的方法，所述方法用脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的親水性肽培養長雙歧桿菌。

在本發明的一種實施方式中，所述脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的親水性肽作為培養基的氮源。

在本發明的一種實施方式中，所述培養基的成分還含有葡萄糖、無水乙酸鈉、KH₂PO₄、K₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O、FeSO₄、檸檬酸氫二銨、吐溫、半胱氨酸鹽酸鹽、CaCl₂、酵母浸出粉、胡蘿卜汁。

本發明還提供了脯氨酸含量介于16％～20％、分子量介于1500～2000Da的親水性肽的制備方法，具體步驟如下：