[發明專利]一種干細胞培養瓶支架裝置及使用方法

在審

• 申請號: 202110596068.0
• 申請日: 2021-05-31
• 公開（公告）號: CN113337400A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 魏浦;鄧子輝;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 北京艾頤生物科技有限公司
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/24
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及干細胞領域，具體提供一種干細胞培養瓶支架裝置及使用方法。該支架裝置由側支架和活動支架組成，側支架為固定不動架子，起到整體支撐作用。活動支架設有固定擋板和滑塊組成的可調節大小的培養瓶存放區，可沿一側連在側支架上的軸順時針和逆時針旋轉10度，起到搖晃混勻培養瓶和使其中的液體集中在底部的作用；活動支架分三層，每層可放四個培養瓶。使用時將培養瓶置于活動支架的培養瓶放置區，然后整體置于生物安全柜和超凈工作臺中，利用活動支架的可旋轉性完成廢液的移除、加液的混勻、細胞的收集等。本培養瓶支架系統可有效輔助完成批量培養瓶換液、細胞傳代和收集操作，使整個過程便利化，節約大量時間。

所屬領域

本發明屬干細胞領域，具體涉及一種干細胞培養瓶支架裝置及使用方法。

背景技術

隨著間充質干細胞存儲建庫和臨床應用研究的開展，批量擴增已成為干細胞生產的主要方式。當前，間充質干細胞批量擴增有多種可供選擇的方式，如細胞工廠、3D微載片懸浮培養等，但培養瓶培養因其操作簡單、安全性高等優勢仍是當前最主要方式。每次操作培養瓶數量從十幾瓶到幾十瓶不等。常規條件下，每個培養瓶在細胞傳代或收集過程中都要進行如下操作：拿起瓶子、倒掉培養基、加入清洗液清洗、倒掉清洗液、加入胰酶消化(搖勻)、放下瓶子、吹起細胞和將細胞轉移到離心管中等，中間重復操作不僅費時，而且費力，成為培養瓶規模化培養中亟待解決的問題。

發明內容

本發明提供一種細胞培養瓶支架裝置及使用方法，該裝置由側支架(4)、活動支架(5)組成，可同時放置12個培養瓶供操作。該裝置可對不同規格的培養瓶實現批量操作：去上清、細胞清洗、加酶混勻等操作，整個過程方便快捷，節約大量時間。

上述側支架(4)為固定支架，位于培養瓶支架兩端；每個由長方形底座和長方形豎板組成，豎板上平行底板排列有三組孔，每組兩孔，一孔為圓形，用于連接活動支架的后軸，起固定活動支架和為其提供旋轉支撐的孔；另一孔為弧形孔，為活動支架轉軸螺桿(12)連接位置，活動支架轉軸螺桿可在其中沿弧線上下移動，調節活動支架傾斜位置。整個側支架起到固定培養瓶支架的作用。

上述活動支架(5)由三根有槽滑竿組成，滑竿上設有固定擋板(1)和滑塊 (2)，每個固定擋板和對應滑塊形成一個可調節的培養瓶存放位置，固定擋板不能移動，滑塊可在滑槽上移動，調節滑塊與固定擋板之間的距離從而可以適合放置不同大小培養瓶，每個活動支架可放四個培養瓶。

上述活動支架沿長軸兩側各有一軸，后軸兩端放置在固定支架上，前軸為活動支架轉軸螺桿，可在固定支架上的弧形槽中移動，使整個活動支架以后軸為中心順時針、逆時針旋轉，調節活動支架的傾斜位置。

活動支架共有三組，每組可放置4個培養瓶，三組共可放12個培養瓶。

上述使用方法，包括如下步驟：

1)調整活塊位置，使滑塊與固定擋板間的大小適合培養瓶的尺寸。

2)將培養瓶從孵箱中取出，放置在架子上，轉移至生物安全柜或超凈工作臺中。

3)打開培養瓶，逆時針移動活動支架轉軸螺桿使培養品傾斜一定角度、培養液集中于瓶底，用移液管移去所有培養基。

4)加入生理鹽水或PBS，順時針、逆時針移動活動支架轉軸螺桿2-3次清洗細胞，止于逆時針移動活動支架轉軸螺桿使培養瓶傾斜一定角度、培養液集中于瓶底，用移液管移去所有培養基。

5)加入消化酶，順時針、逆時針移動活動支架轉軸螺桿2-3次使消化酶均勻分布在整個培養瓶中，止于活動支架成水平位置，室溫孵育消化3-5分鐘。

6)加入血清，順時針、逆時針移動活動支架轉軸螺桿2-3次使血清均勻分布在整個培養瓶中終止消化，止于逆時針移動活動支架轉軸螺桿使培養瓶傾斜一定角度、液體集中于瓶底。

7)用移液管吹打使細胞從瓶壁上脫落分散到液體中，吸出細胞懸液。