[發明專利]一種多重信號放大技術檢測白血病干細胞腫瘤標志物CD123的電化學免疫傳感方法

有效

• 申請號: 202110595620.4
• 申請日: 2021-05-29
• 公開（公告）號: CN113155930B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 陳勇;劉愛林;李鑫;王青
• 申請（專利權）人: 福建醫科大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48;G01N33/574;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/68
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

本發明公開一種多重信號放大技術檢測白血病干細胞腫瘤標志物CD123的電化學免疫傳感方法。包括利用納米金材料、氨基對苯二甲酸導電聚合物膜和酶催化多重信號放大技術，通過對CD123檢測研究，構建用于白血病干細胞腫瘤標志物CD123檢測的電化學免疫傳感方法。實驗結果表明在最佳的實驗條件下，在0.02?2.5μg/mL的CD123濃度范圍內該免疫傳感器的電流信號與CD123濃度呈現良好的線性關系，檢測限低至7ng/mL。所建立的電化學免疫傳感器不僅穩定可靠，經濟方便而且具有準確、高靈敏度和高特異性的優點，可很好地應用于CD123的檢測，為白血病病人的診斷以及療效判斷和預后評估提供一個新的檢測平臺，具有優良的潛在臨床應用價值。

技術領域

本發明涉及一種多重信號放大技術檢測白血病干細胞腫瘤標志物CD123的電化學免疫傳感器方法。

背景技術

納米電化學免疫傳感器是一種新興的生物傳感器，它結合了納米技術、電化學分析法和免疫學技術，其操作簡單、成本低廉、分析速度快、靈敏度高、選擇性好，成為許多檢測技術的首選。近年來，電化學免疫傳感器發展迅速，例如：用于癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）、前列腺特異性抗原（PSA）、CA125等標志物檢測的電化學免疫傳感器研究已有很多文獻報道。納米電化學免疫傳感器以腫瘤細胞及其相關標志物為研究對象，在臨床醫學、基礎醫學、化學、環境、生物、農業等方面已廣泛應用。

白血病(leukemia)是造血干細胞發育過程中某一階段細胞惡性增生的克隆性異質性疾病。其中以急性白血?。ˋcute?leukemia,AL）居多。白血病患者體內存在部分微量的細胞群,這些細胞有著無限增殖和自我更新能力,是白血病發生惡化的起始細胞，多處于靜止期,并且這群細胞通常對化療藥物不敏感，能逃逸化療藥物的攻擊，是白血病難治、復發的根源。這群白血病細胞被稱為白血病干細胞(leukemia?stem?cells，LSCs)，?白細胞介素-3受體α鏈(Cluster?of?Differentiation?123,?CD123)是目前公認的可以從正常造血干細胞中識別LSC的一個標記。故CD123是與白血病相關的敏感而特異性的腫瘤標志物。據報道，CD123在急性髓性白血病病人骨髓血液中高表達，在正常人血液中不表達。CD123的敏感檢測對白血病的診斷、治療和預后判斷均有重要意義。

目前CD123等白血病干細胞標志物的檢測方法主要有流式細胞術、免疫組化技術、酶聯免疫吸附法、微點陣技術和基因擴增技術等，然而這些技術需要大型精密儀器，或是成本較高、費時費力，存在一定的局限性。因此發展一種簡單、可靠、廉價的檢測技術以望替代上述傳統方法具有廣闊的應用前景。電化學免疫傳感器由于其簡單的樣品前處理，普通的儀器操作，快速的測試時間和高靈敏度而在免疫分析中引起了廣泛的關注。目前，電化學免疫傳感器技術應用于白血病干細胞腫瘤標志物的檢測的研究，尚未見報道。故本研究以CD123為檢測目標，結合免疫技術、納米技術及電化學傳感技術，從納米材料的功能化制備、新型傳感界面的構建等方面進行探索和研究，擬構建一種用于CD123快速、經濟、操作簡便和靈敏檢測的納米電化學免疫傳感器，并建立靈敏、快速、經濟的白血病干細胞標志物CD123檢測的新方法。