[發(fā)明專利]GRPEL1突變基因、檢測(cè)其的引物、試劑盒和方法以及其用途

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110592235.4
• 申請(qǐng)日: 2021-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN113186274A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王開宇;馬鑫瑞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州福瑞醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12N15/11;G01N33/68
• 代理公司: 北京中濟(jì)緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 張磊

1.一種突變GRPEL1基因或突變GRPEL1蛋白，其特征在于：所述突變GRPEL1基因與人類基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

4號(hào)染色體物理位置為7064181的堿基由G突變?yōu)锳、4號(hào)染色體物理位置為7062820的堿基由A突變?yōu)镃；

所述突變GRPEL1基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.238CT、c.423TG；

所述突變GRPEL1蛋白的序列與SEQ ID NO.2的序列相比具有以下突變中的至少一種：

p.Arg80Ter、p.Tyr141Ter。

2.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述的突變GRPEL1基因或突變GRPEL1蛋白的方法，所述方法用于非診斷目的，其特征在于：所述方法包括檢測(cè)GRPEL1基因或GRPEL1蛋白中是否存在突變位點(diǎn)，所述突變位點(diǎn)為如下至少一種：

Chr4(GRCh37):g.7064181GA，cDNA序列發(fā)生c.238CT，p.Arg80Ter；

Chr4(GRCh37):g.7062820AC，cDNA序列發(fā)生c.423TG，p.Tyr141Ter。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法包括利用如下至少一組引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增的步驟：

SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序包括：94-100℃，1-10min；94-95℃，3-5min，95-96℃，25-30s，58-60℃，25-30s，循環(huán)30-40次，70-72℃，1-10min。

5.一種檢測(cè)突變GRPEL1基因的試劑，其特征在于：所述試劑為核酸檢測(cè)探針或引物；

所述核酸檢測(cè)探針與突變GRPEL1基因互補(bǔ)；所述突變GRPEL1基因與人類基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

4號(hào)染色體物理位置為7064181的堿基由G突變?yōu)锳、4號(hào)染色體物理位置為7062820的堿基由A突變?yōu)镃；

所述突變GRPEL1基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.238CT、c.423TG；

所述核酸檢測(cè)探針與突變GRPEL1基因互補(bǔ)的區(qū)域包括選自如下至少一種的物理位置或cDNA序列位置：

物理位置第7064181位、第7062820位；cDNA序列第238位、第423位；

所述引物為具有如下序列的至少一組引物：

SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。

6.一種檢測(cè)突變GRPEL1基因的試劑盒，其特征在于：它包括權(quán)利要求5所述的試劑。

7.一種檢測(cè)突變GRPEL1基因或突變GRPEL1蛋白的試劑在制備嬰兒致死性線粒體疾病檢測(cè)試劑中的應(yīng)用；

所述突變GRPEL1基因與人類基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

4號(hào)染色體物理位置為7064181的堿基由G突變?yōu)锳、4號(hào)染色體物理位置為7062820的堿基由A突變?yōu)镃；

所述突變GRPEL1基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.238CT、c.423TG；

所述突變GRPEL1蛋白的序列與SEQ ID NO.2的序列相比具有以下突變中的至少一種：

p.Arg80Ter、p.Tyr141Ter。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述嬰兒致死性線粒體疾病檢測(cè)試劑為基因芯片用試劑、DNA擴(kuò)增用試劑、反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增用試劑、限制性內(nèi)切酶酶切方法用試劑或測(cè)序用試劑。