[發(fā)明專利]一種新型植物免疫蛋白及其生產(chǎn)工藝

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110591852.2
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113439745A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙宇凡;張洋;鄒婷婷;朱文婷;張淳梅;朱贊穎
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: A01N43/16
• 分類號: A01N43/16;A01N37/46;A01N63/30;A01N25/12;A01N25/22;A01P1/00;A01P3/00;A01P21/00;C12N1/14;C12N1/20;C12R1/07;C12R1/645
• 代理公司: 蘇州吳韻知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32364
• 代理人: 王銘陸

1.一種新型植物免疫蛋白，其特征在于：按重量份計，所述植物免疫蛋白包括以下組分：免疫蛋白1-20份，腐植酸4-10份，磷酸鉀緩沖液20-30份，蛋白保護劑1-4份。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白，其特征在于：所述免疫蛋白包括鏈格孢霉菌和炭疽菌，鏈格孢霉菌和炭疽菌質(zhì)量比為2～4:1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白，其特征在于：所述蛋白保護劑包括40-45wt％氨基葡萄糖、30-35wt％硫酸軟骨素、10-15wt％β-環(huán)糊精、5-20wt％十八烷基二甲基胺乙內(nèi)酯。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白，其特征在于：所述腐植酸為黃腐殖酸。

5.一種新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：包括以下步驟：

S1.將鏈格孢霉菌和炭疽菌在全營養(yǎng)性培養(yǎng)基條件下分別活化，富集培養(yǎng)48-72h，用于接種，將鏈格孢霉菌和炭疽菌的菌體于無菌操作條件下，接種于固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，進行一級發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中攪拌并通氣，得到第一發(fā)酵液；

S2.將第一發(fā)酵液接種于固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，進行二級發(fā)酵培養(yǎng)24～36h，得到第二發(fā)酵液；

S3.將第二發(fā)酵液接種于固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，進行三級發(fā)酵培養(yǎng)8～16h，得到三級發(fā)酵培養(yǎng)；

S4.將三級發(fā)酵培養(yǎng)液中加入磷酸鉀緩沖液和蛋白保護劑混合攪拌0.5～1h，得到第一混合液；

S5.將第一混合液中進行膠體磨細胞破碎，然后添加腐殖酸，混合攪拌1～3h，得到第二混合液；

S6.將第二混合液進行噴霧干燥，得到新型植物免疫蛋白。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：所述步驟S1菌體的接種量為6％～10％，一級發(fā)酵培養(yǎng)的溫度為25℃～35℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：所述步驟S1一級發(fā)酵培養(yǎng)攪拌速度為100rpm,通氣量為200L/h，pH6.8-7.0，培養(yǎng)過程中自動補加濃氨溶液以及稀鹽酸調(diào)節(jié)pH，溶氧設(shè)定30％～35％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：所述步驟S2二級發(fā)酵培養(yǎng)接種量為5-10％，攪拌速度為150rpm，通氣量為1.8m³/h，pH6.8-7.0，35～37℃培養(yǎng)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：所述步驟S3三級發(fā)酵培養(yǎng)接種量為3-7％，攪拌速度為200rpm，通氣量為1.0m³/h，pH6.8-7.0，35～37℃培養(yǎng)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新型植物免疫蛋白的生產(chǎn)工藝，其特征在于：按重量份計，所述固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基包括以下組分：

酵母蛋白胨50～60份、大豆蛋白胨5～7份、葡萄糖2～4份、L-半胱氨酸0.5～2份、磷酸二氫鉀0.5～1份、碳酸氫鈉0.5～1份、氯化鈉0.2～0.4份、氯化鈣0.3～0.5份、硫酸鎂0.1～0.3份、瓊脂0.2～0.4份。