[發(fā)明專利]一種一體化下開口核酸快提試管、快提檢測(cè)裝置及方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110590201.1
• 申請(qǐng)日: 2021-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN113186098A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王德明;周杰鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寧波康程德諾生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): C12M1/42
• 分類號(hào): C12M1/42;C12M1/24;C12M1/02;C12M1/00;C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6851
• 代理公司: 杭州恒翌專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33298
• 代理人: 王從友

1.一種一體化下開口核酸快提試管，該試管包括主管（1）；主管（1）內(nèi)部腔體從上到下依次設(shè)置有裂解區(qū)（2）、洗滌區(qū)（4）和洗脫區(qū)（6）；裂解區(qū)（2）與洗滌區(qū)（4）以及洗滌區(qū)（4）與洗脫區(qū)（6）之間分別設(shè)置有疏水密封層分隔開，并在洗滌區(qū)（4）和洗脫區(qū)（6）內(nèi)分別設(shè)置有磁珠洗滌液和核酸洗脫液；其特征在于，所述的主管（1）內(nèi)部腔體還設(shè)置有由裂解區(qū)（2）延伸至洗脫區(qū)（6）的磁道（7），所述的磁道（7）下端與主管（1）一體成型并且設(shè)置有與外界相連通供磁棒伸入的開口，磁道（7）上端封閉并且位于洗脫區(qū)（6）內(nèi)；主管（1）頂端設(shè)置有管蓋（180），管蓋（180）包括蓋體（182）、存儲(chǔ)槽（183）和密封蓋（184）；密封蓋（184）位于存儲(chǔ)槽（183）頂端開口并且將其封閉；存儲(chǔ)槽（183）底部設(shè)置有落料孔（185），存儲(chǔ)槽（183）通過落料孔（185）與主管（1）的裂解區(qū)（2）相連通，并且落料孔（185）內(nèi)設(shè)置有錫紙將其封閉。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，密封蓋（184）為彈性材料，密封蓋（184）與存儲(chǔ)槽（183）過盈配合將存儲(chǔ)槽（183）頂端開口封閉。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，密封蓋（184）與蓋體（182）之間通過可彎折材料相連接。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，主管（1）內(nèi)部腔體設(shè)置有第一分隔塞和第二分隔塞；磁道（7）外壁與第一分隔塞和第二分隔塞之間都存在環(huán)形縫隙；疏水密封層分別位于第一分隔塞和第二分隔塞內(nèi)并且將所在位置的主管（1）內(nèi)部腔體填充密封。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，疏水密封層為石蠟或者液相疏水層。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，第一分隔塞和第二分隔塞都為彈性材料。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，洗脫區(qū)（6）內(nèi)設(shè)置有多個(gè)隔板，多個(gè)隔板在徑向兩端分別與磁道（7）外壁和主管（1）腔體內(nèi)壁相連接從而將洗脫區(qū)（6）分隔為多個(gè)支管。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種一體化下開口核酸快提試管，其特征在于，洗脫區(qū)（6）底部設(shè)置有底座（60），洗脫區(qū)（6）底部出液口為開口并且與外界相連通；底座（60）設(shè)置有收集孔（64）和磁道連接孔（65），收集孔（64）與洗脫區(qū)（6）底部出液口相連通并且其上端與洗脫區(qū)（6）底部出液口外壁相嵌合；磁道下端開口通過磁道連接孔（65）與外界相連通并且磁道連接孔（65）與磁棒外壁相配合；優(yōu)選，裂解區(qū)（2）內(nèi)壁豎直固定設(shè)置有多根肋條（21），多根肋條（21）凸出于裂解區(qū)（2）內(nèi)壁；優(yōu)選，底座（60）外壁設(shè)置有螺紋，并且底座（60）外壁螺紋與螺紋蓋相旋合。

9.一種一體化下開口核酸快提和檢測(cè)裝置，其特征在于，包括權(quán)利要求1-8任意一項(xiàng)所述的一體化核酸快提試管和磁棒，磁棒外壁與磁道（7）內(nèi)孔相配合。

10.一種一體化核酸快提和檢測(cè)方法，其特征在于，該方法采用權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)所述的一種一體化下開口核酸快提試管，該方法包括以下的步驟：

（S1）將裂解區(qū)（2）內(nèi)預(yù)置裂解液，并且將磁珠或蛋白酶k或兩者的混合體預(yù)置入存儲(chǔ)槽（183）中，將密封蓋（184）打開并且把落料孔（185）位置的錫紙捅破后，將待檢測(cè)樣本細(xì)胞添加至裂解區(qū)（2）；磁珠或蛋白酶k或兩者的混合體也沿著落料孔（185）落入裂解區(qū)（2），樣本細(xì)胞被裂解液裂解并釋放出完整核酸并且與磁珠相互結(jié)合；或者直接將落料孔（185）位置的錫紙捅破并且將裂解后含有待檢測(cè)樣本細(xì)胞和磁珠的溶液添加至裂解區(qū)（2）進(jìn)行裂解；

（S2）將磁棒從磁道（7）下端開口插入至裂解區(qū)（2）后下移至洗滌區(qū)（4），磁棒吸引磁珠貼合磁道（7）外壁并且跟隨磁棒穿過疏水密封層下移至洗滌區(qū)（4）；當(dāng)疏水密封層為石蠟時(shí)，先對(duì)主管（1）加熱使得石蠟熱熔；

（S3）磁珠洗滌液除去與磁珠相結(jié)合的核酸中的蛋白質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽等一些雜質(zhì)后，磁棒帶動(dòng)磁珠繼續(xù)下移穿過第二分隔塞內(nèi)的疏水密封層至洗脫區(qū)（6）；

（S4）核酸洗脫液與洗滌后的磁珠相接觸將磁珠上結(jié)合的核酸洗脫至洗脫區(qū)（6）的核酸洗脫液中；

（S5）核酸在核酸洗脫液中進(jìn)行PCR或等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，并且核酸洗脫液中引入分子信標(biāo)，使得外部設(shè)備通過熒光定量檢測(cè)即可實(shí)時(shí)觀察到PCR或等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，并通過分析熒光值得到樣品核酸的數(shù)量；或者將底座（60）從主管（1）的洗脫區(qū)（6）部位拔下后，底座（60）外壁螺紋與螺紋蓋相旋合從而將洗脫區(qū)（6）開口封閉并且拿至其他設(shè)備中進(jìn)行核酸檢測(cè)完成一體化核酸快提和檢測(cè)過程。