[發明專利]一種口蹄疫O型PanAsia-2譜系儲備疫苗毒株及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 202110589782.7
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113337476B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發明（設計）人: 李平花;劉在新;盧曾軍;黃書倫;孫普;查晶晶;李冬;白興文;曹軼梅;馬雪青;李坤;袁紅;付元芳
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N15/42;C12N15/63;A61K39/295;A61K39/135;A61P31/14
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 薛紅凡

本發明提供了一種口蹄疫O型PanAsia?2譜系儲備疫苗毒株及其構建方法和應用，屬于獸藥生物制品技術領域?？谔阋咧亟M病毒rHN/TUR09/VP1以O/HN/CHA/93病毒株為骨架，嵌合O/TUR/5/2009的VP1基因所得。rHN/TUR09/VP1不僅與遺傳關系較近的口蹄疫O型PanAsia譜系和Ind?2001譜系毒株的抗原高度匹配，而且與遺傳關系較遠的口蹄疫O型Cathay譜系和Mya?98譜系毒株的抗原匹配，表明rHN/TUR09/VP1不僅能很好的免疫防控我國當前O型多譜系FMD病毒株的流行，而且可作為戰略儲備疫苗毒株用于我國邊境地區O/Panasia?2譜系口蹄疫的有效防控。

技術領域

本發明屬于獸藥生物制品技術領域，具體涉及一種口蹄疫O型PanAsia-2譜系儲備疫苗毒株及其構建方法和應用。

背景技術

FMD(Foot-and-mouth?disease,FMD)是口蹄疫病毒(Foot-and-mouth?diseasevirus,FMDV)牛、羊和豬等主要家畜的烈性傳染病。該病的爆發和流行嚴重危害畜群的生產力和畜產品質量，給發病地區的畜牧業及其相關產業造成巨大的經濟損失。因此，該病是我國重點防控的動物疫病之一。

我國是口蹄疫流行比較嚴重的國家，尤其是O型口蹄疫對我國畜牧養殖業的危害最嚴重。國家口蹄疫參考實驗室分子流行病學調查顯示，除了歷史存留的O型Cathay譜系毒株外，我國當前流行的O型Panasia，O型Mya-98譜系毒株以及這幾年廣泛引發疫情的O型Ind-2001譜系毒株均為境外流行毒株傳入。而且每傳入一個新毒株，都會引起新一輪疫情的暴發。如2017年新傳入我國的Ind-2001譜系毒株，先在新疆引起2起疫情，2018年在湖北、安徽和貴州等多地引起9起疫情，而且該毒株仍在我國的許多省份流行和傳播，對我國畜牧養殖業造成了巨大的影響。我國邊境線較長，且周邊國家和地區FMD疫情常年不斷，尤其是近年來流行于中東，西亞等地區的O型Panasia-2系(O型Panasia的另一分支)毒株，具有較強的流行潛力，給我國口蹄疫的防控構成了新的威脅。因此，為了有效防范O/PanAsia-2病毒株傳入我國的風險，必須針對性地開展相關研究，做好疫苗戰略儲備。

FMDV衣殼(P1基因)由4種結構蛋白VP1、VP2、VP3和VP4各60分子構成，它們是病毒感染和疫苗免疫誘導機體產生保護性抗體的主要免疫基因，其中VP1、VP2、VP3結構蛋白上包含許多的線性或構象性的抗原表位或抗原決定簇，它們在誘導保護性抗體的產生方面發揮著非常重要的作用。但FMDV是小RNA病毒，在免疫壓力下，暴露于衣殼外部的VP1基因高度易變，常導致病毒抗原性發生改變，直接影響了型內不同譜系病毒株之間交叉免疫保護，給疫病的預防控制造成一定的阻礙。

大量的研究表明，利用FMDV反向遺傳操作技術替換流行毒株的結構蛋白P1或VP1基因可以快速發展FMDV疫苗候選株。然而現有技術不恰當的基因重組會影響重組后病毒的復制能力，或者導致重組病毒無法拯救成功，給FMDV疫苗的研發帶來了較大的技術難題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種口蹄疫O型PanAsia-2系儲備疫苗毒株及其構建方法和應用，所述口蹄疫病毒株不僅能夠同時對近些年我國流行的O型PanAsia譜系、Ind-2001譜系、Mya98譜系和Cathay譜系口蹄疫病毒株具有較好的交叉反應性，大大拓展了病毒疫苗的抗原譜，有利于提高我國當前O型口蹄疫的有效防控，而且可以作為戰略儲備疫苗毒株，有效防范未來隨時可能傳入我國的O/PanAsia-2口蹄疫的流行。

本發明提供了一種口蹄疫O型PanAsia-2系儲備疫苗毒株rHN/TUR09/VP1，以口蹄疫病毒O/HN/CHA/93為骨架，嵌合了口蹄疫O型O/PanAsia-2譜系疫苗株O/TUR/5/2009的VP1基因所得。

優選的，所述口蹄疫疫苗株O/TUR/5/2009的VP1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。