[發明專利]一種止血材料及其制備方法

有效

• 申請號: 202110588984.X
• 申請日: 2021-05-28
• 公開（公告）號: CN113398317B
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發明（設計）人: 王芳芳;梅勁;張蕊;高妞妞
• 申請（專利權）人: 寧波市第一醫院
• 主分類號: A61L24/00
• 分類號: A61L24/00
• 代理公司: 廣州市諾豐知識產權代理事務所(普通合伙) 44714
• 代理人: 許飛;任毅

本發明公開了一種止血材料及其制備方法。將動物組織脫細胞處理后，凍干、粉碎、胃蛋白酶進一步消化，之后使用低濃度PBS處理，后處理得到止血材料。本發明一些實例的止血材料，具有良好的生物相容性和止血性能，制備工藝更為簡單，成本低。本發明一些實例的制備方法，不需要進行交聯處理，操作簡便，成功率高，用時短。本發明一些實例的制備方法，可以方便地通過控制PBS的濃度調控止血材料的凝血時間。

技術領域

本發明涉及醫用材料，具體涉及一種止血材料及其制備方法。

背景技術

在創傷還是手術過程中，止血是都是非常關鍵的一步，及時有效的止血能夠加速傷口的愈合，甚至保證生命安全。對于不同程度的出血，所采取的止血技術也會不一樣，嚴重的出血可能需要夾閉或者直接阻塞血管，而對于更常見的輕度創傷，手術切割傷、術后并發癥等所致的出血，使用外部止血材料會更加適用。

現有技術已經開發出多種止血材料，并且在不斷被改進。目前止血材料中，主要分無機止血材料和天然止血材料，用于制備止血材料的無機成分主要是沸石、粘土、高嶺土、介孔硅等，鑒于生物相容性和降解性差的問題，天然成分的止血材料更受歡迎，主要由殼聚糖、纖維素、明膠、淀粉、海藻酸鈉等組成。大多數是將幾種成分混合做成多孔止血海綿，或者將成分經過改性的方式，或加到上無紡布或者紗布上等方式，增強材料整體的凝血效果。

去細胞支架直接來源于機體組織，機體器官或組織取下來之后，經過洗滌劑等處理之后，去除細胞，剩余的支架又稱去細胞支架，主要保留著細胞外基質的三維結構和活性蛋白成分，為細胞粘附、增殖、遷移提供了很好的微環境，因此，被研究者大量用于再生領域的研究，其最大的優勢就是促再生性能和生物相容性，而在去細胞支架的基礎上，通過一些化學或物理處理，強化或者支架材料的力學性能，保留其本身優秀的促再生能力，能擴大其應用場景。

Ventrua等人將豬皮切成小片，暴露于胰蛋白酶溶液中，用十二烷基硫酸鈉、Triton X-100進行洗滌，脫細胞之后，樣品用蒸餾水洗滌并凍干，研磨后保存在-20℃下備用，研磨后的ECM粉在胃蛋白酶緩沖液中溶解48h，得到均勻的溶液。均質溶液的pH用1MNaOH中和。勻漿中和后的ECM溶液用PBS稀釋得到10% (HECM10)、15% (HECM15)和20%(HECM20)濃度(w/v)。ECM溶液置于5mm × 5mm的塑料模具中，并與EDC/NHS (50mmol:20mmol)溶液交聯24小時。樣品在冷凍干燥器中冷凍干燥48小時，得到多孔海綿，該海綿具有止血的潛力，能夠吸附血小板，體內實驗也證明其明顯縮短了鼠尾和兔股動脈出血時間。這是唯一一篇將去細胞豬皮用作止血材料基材的研究。

現有的脫細胞基質止血材料，制備工藝普遍復雜，交聯劑的加入在一定程度上增加了細胞毒性，且效果也有待進一步提高。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的至少一個不足，提供一種新型的止血材料及其制備方法。

本發明所采取的技術方案是：

一種止血材料，其制備方法包括如下步驟：

S1) 取動物組織，進行脫細胞處理；

S2) 將脫細胞處理后的動物組織清洗干凈，凍干后粉碎，得組織粉；

S3) 將組織粉加入溶液中，加入胃蛋白酶消化處理8～36 h；

S4) 消化處理完成后，中止酶解反應，得消化液；

S5) 在消化液中加入磷酸鹽緩沖液，使消化液中磷酸鹽緩沖液的濃度為0～0.003M，后處理得到止血材料。

在一些實例中，所述動物組織為富含膠原蛋白的動物組織。富含膠原蛋白的動物組織在處理后往往具有更好的機械性能，同時其來源也較為豐富同時易于處理，是更佳的選擇。