[發明專利]一種共價有機骨架封裝酶的制備方法有效
| 申請號: | 202110588433.3 | 申請日: | 2021-05-28 |
| 公開(公告)號: | CN113308457B | 公開(公告)日: | 2022-07-29 |
| 發明(設計)人: | 王魯良;楊曉帥;孫舒揚;柳全文;劉玉申;劉芳潔;胡振華 | 申請(專利權)人: | 魯東大學 |
| 主分類號: | C12N11/082 | 分類號: | C12N11/082;C12N9/08;C12N9/04 |
| 代理公司: | 煙臺上禾知識產權代理事務所(普通合伙) 37234 | 代理人: | 毛毛 |
| 地址: | 264000 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 共價 有機 骨架 封裝 制備 方法 | ||
1.一種共價有機骨架封裝酶的制備方法,其特征在于,將聚乙烯聚吡咯烷酮保護的酶溶液先與醛基配體溶液混合,再與氨基配體溶液混合,離心,所得沉淀為共價有機骨架封裝酶;
所述的酶為葡萄糖氧化酶和/或辣根過氧化物酶;所述的醛基配體為1,3,5-三醛基均苯三酚,所述的氨基配體為聯苯二胺;
包括如下步驟:
(1)將酶溶解于緩沖溶液中,得酶溶液;
(2)向步驟(1)獲得的酶溶液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮,攪拌均勻,得混合液A;
(3)將1,3,5-三醛基均苯三酚溶解于無水乙醇中,得溶液A;
(4)將步驟(3)獲得的溶液A與步驟(2)獲得的混合液A混合,攪拌0.5~2h,得混合液B;
(5)將聯苯二胺溶解于無水乙醇中,得溶液B;
(6)將步驟(5)獲得的溶液B與步驟(4)獲得的混合液B混合,攪拌0.5~12h,得混合液C;
(7)將步驟(6)獲得的混合液C離心,得沉淀,干燥后即為共價有機骨架封裝酶。
2.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(6)獲得的混合液C中,酶的終濃度為1~500μg/mL。
3.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(6)獲得的混合液C中,聚乙烯聚吡咯烷酮的終濃度為1~700μg/mL。
4.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(6)獲得的混合液C中,1,3,5-三醛基均苯三酚的終濃度為0.1~1.0mmol/L。
5.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(6)獲得的混合液C中,聯苯二胺的終濃度為0.3~1.5mmol/L。
6.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟(7)中,所述的離心的條件為4℃在10000rpm轉速下離心5~30min。
7.一種共價有機骨架封裝酶,其特征在于,使用如權利要求1~6任一項所述的制備方法獲得。
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