[發明專利]一種準確、快速測定黃芩藥材及其制品中總黃酮含量的方法

在審

• 申請號: 202110588021.X
• 申請日: 2021-05-27
• 公開（公告）號: CN113310979A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 趙振;安慶蓮;馬燁;王哲
• 申請（專利權）人: 南京益唯森生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31;G01N21/33
• 代理公司: 江蘇銀創律師事務所 32242
• 代理人: 李挺

1.一種準確、快速測定黃芩藥材及其制品中總黃酮含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)黃芩提取液制備：準確稱取黃芩粉m(g)，然后加入乙醇水溶液提取，提取結束后過濾，濾渣重復提取0～2次，合并所有濾液并定容至V₀(mL)備用；

(2)黃芩苷標準溶液配制：準確稱取m₁(mg)黃芩苷標準品，使用乙醇水溶液溶解并定容至V₁(mL)，制得濃度為m₁/V₁(mg/mL)的黃芩苷標準品溶液；

(3)黃芩苷標準曲線建立：移取V₂、V₃···Vx(mL)的黃芩苷標準品溶液于V_y(mL)容量瓶中，x為2、3、4、5···，分別加入等量的弱酸性鋁鹽溶后，使用乙醇溶液稀釋定容，形成一系列濃度梯度的黃芩苷標準品溶液，搖勻避光放置20～60min后，以試劑為空白，經紫外-可見分光光度計測定吸光度值，最后以黃芩苷標準品濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標繪制出標準曲線Y＝aX+b，其中，Y為吸光度值，X為黃芩苷標準品濃度：X＝(1000Vx(m₁/V₁))/Vy(μg/mL)，a為系數，b為截距；

(4)樣品總黃酮含量測定：移取V_z(mL)的黃芩提取液于Vy(mL)容量瓶中，按步驟(3)中方法顯色并測定吸光度值A，最后按下列公式計算黃芩總黃酮含量：

式中：A為黃芩提取液的吸光度值；b為黃芩苷標準曲線截距；n為稀釋倍數，n＝V₀/Vz；V為顯色的溶液體積，即Vy(mL)；a為黃芩標準曲線系數；m為步驟(1)中稱取黃芩粉質量g。

2.根據權利要求1所述的一種準確、快速測定黃芩藥材及其制品中總黃酮含量的方法，其特征在于，所述弱酸性鋁鹽溶液為硝酸鋁溶液、氯化鋁溶液其中的一種，所述弱酸性鋁鹽溶液的溶劑為水或乙醇溶液，所加弱酸性鋁鹽溶液的濃度為10％，體積為5mL。

3.根據權利要求1所述的一種準確、快速測定黃芩藥材及其制品中總黃酮含量的方法，其特征在于，步驟(3)中避光放置20min，使用紫外-可見分光光度計測定吸光度值時，檢測波長為330nm。

4.根據權利要求1所述的一種準確、快速測定黃芩藥材及其制品中總黃酮含量的方法，其特征在于，黃芩苷標準品濃度X的取值范圍為：2.64～19.8μg/mL。