[發明專利]一種含有干細胞外泌體的精華液及其制備方法

在審

• 申請號: 202110587344.7
• 申請日: 2021-05-27
• 公開（公告）號: CN113304097A
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 占震鋒;李慶靜
• 申請（專利權）人: 上海南濱江細胞生物科技有限公司
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/98;A61K8/9789;A61K8/73;A61K8/65;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08
• 代理公司: 合肥正則元起專利代理事務所(普通合伙) 34160
• 代理人: 劉念

1.一種含有干細胞外泌體的精華液，其特征在于，包括如下重量份的原料：皮膚干細胞10-13份、透明質酸鈉15-20份、變性乙醇6-8份、羥乙基哌嗪乙烷磺酸2-6份、改性膠原蛋白5-8份、有機硅蠟4-6份、辛基十二醇3-5份、抗壞血酸葡糖苷2-4份、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸銨1-3份、去離子水10-12份；

其中改性膠原蛋白由如下步驟制得：

步驟S1，向膠原蛋白中加入去離子水配制成20g/L的溶液，升溫至50℃反應30-40min，經抽濾除去沉淀，得到膠原蛋白溶液；

步驟S2，向殼聚糖中加入醋酸溶液配制成20g/L的溶液，升溫至50℃反應30-40min，得到殼聚糖溶液；

步驟S3，將油茶籽粉碎至40目的油茶籽粉末，向油茶籽粉末中加入石油醚，在室溫下攪拌反應20-24h，靜置，抽濾，取上層清液旋蒸濃縮至原體積的三分之一，得到油茶籽提取物；

步驟S4，將膠原蛋白溶液和殼聚糖溶液按照1：4.2-4.5的質量比混合均勻，向其中加入油茶籽提取物和質量分數25％的甘油，在20℃下攪拌10min，再升溫至60℃回流反應1-2h，得到改性膠原蛋白。

2.根據權利要求1所述的一種含有干細胞外泌體的精華液，其特征在于：步驟S3所述油茶籽粉末、石油醚的質量比為1：10。

3.根據權利要求1所述的一種含有干細胞外泌體的精華液，其特征在于：步驟S4所述油茶籽提取物的用量為膠原蛋白溶液和殼聚糖溶液總質量的5-10％，甘油的用量為膠原蛋白溶液和殼聚糖溶液總質量的3-5％。

4.根據權利要求1所述的一種含有干細胞外泌體的精華液的制備方法，其特征在于：包括如下制備過程：

步驟A1，向皮膚干細胞中加入電轉染工作液、CTF1質粒，得到預轉染物；

步驟A2，對預轉染物進行電擊，得到轉染CTF1基因的皮膚干細胞；

步驟A3，對轉染CTF1基因的皮膚干細胞進行培養，經收集、離心處理，得到干細胞分泌體；

步驟A4，將透明質酸鈉、改性膠原蛋白、變性乙醇、有機硅蠟、羥乙基哌嗪乙烷磺酸攪拌均勻，制得混合物A；

步驟A5，將混合物A和辛基十二醇、抗壞血酸葡糖苷、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸銨、去離子水混合均勻，在70-80℃下乳化10-15min，制得混合物B；

步驟A6，將干細胞分泌體加入至混合物B中，攪拌均勻，制得含有干細胞外泌體的精華液。

5.根據權利要求4所述的一種含有干細胞外泌體的精華液的制備方法，其特征在于：步驟A1所述電轉染工作液的用量為皮膚干細胞質量的8-10倍，CTF1質粒為皮膚干細胞質量的10-20％。