[發明專利]一種新型CRISPR/Cas9基因編輯載體在棉花中的使用方法在審
| 申請號： | 202110583854.7 | 申請日： | 2021-05-27 |
| 公開（公告）號： | CN113122570A | 公開（公告）日： | 2021-07-16 |
| 發明（設計）人： | 金雙俠;張獻龍;周家偉;扶春陽 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/60 |
| 代理公司： | 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491 | 代理人： | 張國棟 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 新型 crispr cas9 基因 編輯 載體 棉花 中的 使用方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種新型CRISPR/Cas9基因編輯載體在棉花中的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)先獲得含有目的序列35S啟動子的載體pK2GW7.0；
2)以pK2GW7.0載體為模板，利用Primer5軟件設計引物，通過PCR擴增獲得35S啟動子的目的序列；
3)利用SbfⅠ、BstBⅠ兩種酶對pRGEB32-GhU6.7-NPTⅡ載體進行雙酶切去除Ubiquitin啟動子得到線性載體，然后與步驟2)中獲得的35S啟動子目的序列進行In-fusion連接，通過測序驗證，得到適用于棉花的新型基因編輯載體。
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