[發明專利]通過反復染色和脫色檢測細胞的方法

在審

• 申請號: 202110583522.9
• 申請日: 2021-05-27
• 公開（公告）號: CN113740305A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發明（設計）人: J·福爾巴赫;C·多澤;D·梅內克;D·貝爾恩特
• 申請（專利權）人: 美天施生物科技有限兩合公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/533
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 黃登高;黃希貴

1.用于通過提供具有通式(I)的綴合物來檢測生物樣本的樣品中的靶部分的方法，

其中Ar、MU和L1作為聚合物的重復單元，

Ar是芳基或雜芳基，

MU是沿著聚合物主鏈均勻或隨機分布的聚合物修飾單元或帶隙修飾單元，

L1是沿著聚合物均勻或隨機分布的芳基或雜芳基，

L2是定位于聚合物的端部上的芳基或雜芳基，

FL是熒光部分，

G1和G2代表氫、鹵素或抗原識別部分，條件是G1或G2中的至少一個是抗原識別部分，

和

a是10至100摩爾%，

b是0.1至50摩爾%，

c是0至90摩爾%，

d是1至10,000，

條件是a + b + c = 100摩爾%，

其特征在于

a)使生物樣本的樣品與至少一種綴合物(I)接觸，從而用綴合物(I)標記被抗原識別部分識別的靶部分；

b)用波長在熒光部分FL的吸收光譜內的光來激發標記的靶部分；

c)通過檢測由熒光部分FL發出的熒光輻射來檢測標記的靶部分，和

d)通過用波長在熒光部分FL的吸收光譜內的光，將綴合物照射足以傳遞足夠能量的時間，使標記的靶部分的熒光部分FL降解，所述能量使由熒光部分FL發出的熒光輻射至少降低了初始熒光輻射的75%。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于Ar是由非離子側鏈取代的芳基或雜芳基重復單元，所述非離子側鏈選自乙二醇寡聚物側鏈、右旋糖酐或甘油。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于MU是沿著聚合物主鏈均勻或隨機分布的聚合物修飾單元或帶隙修飾單元，并且由選自以下的一個或多個任選取代的取代基任選取代：鹵素、羥基、C₁-C₁₂烷基、C₂-C₁₂烯烴、C₂-C₁₂炔烴、C₃-C₁₂環烷基、C₁-C₁₂鹵代烷基、C₁-C₁₂烷氧基、C₂-C₁₈ (雜)芳氧基、C₂-C₁₈ (雜)芳基氨基、C₂-C₁₈ (雜)芳基和(CH₂)x’、(OCH₂CH₂)y’OCH₃，其中x’獨立地為0-20的整數，并且y’獨立地為0至50的整數。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其特征在于L1是沿著聚合物主鏈均勻或隨機分布的芳基或雜芳基，并且由一個或多個側基鏈取代，所述側基鏈由以下封端：i)用于綴合至分子或生物分子，選自胺、氨基甲酸酯、羧酸、羧酸酯、馬來酰亞胺、活化酯、N-羥基琥珀酰亞胺基、肼、酰肼、肼、疊氮化物、炔烴、醛、硫醇及其保護基團的官能團；或ii)作為受體染料的附著的綴合的有機染料，或iii)生物分子。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其特征在于L2是定位于聚合物主鏈的端部上的芳基或雜芳基，并且由一個或多個側基鏈取代，所述側基鏈由以下封端：i)用于綴合至分子或生物分子，選自胺、氨基甲酸酯、羧酸、羧酸酯、馬來酰亞胺、活化酯、N-羥基琥珀酰亞胺基、肼、酰肼、肼、疊氮化物、炔烴、醛、硫醇及其保護基團的官能團；或ii)作為受體染料的附著的有機染料，或iii)生物分子。