[發(fā)明專利]用于檢測早期旋毛蟲病的特異性抗原及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110578507.5
• 申請日: 2021-05-26
• 公開（公告）號: CN113416718A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊娜;桑曉宇;王彥虎;丁瑩瑩;馮穎;陳冉
• 申請（專利權(quán)）人: 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N9/22
• 分類號: C12N9/22;C12N15/55;G01N33/573;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 北京知呱呱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11577
• 代理人: 杜立軍

1.用于檢測早期旋毛蟲病的蛋白質(zhì)，包括第一蛋白質(zhì)和第二蛋白質(zhì)，所述第一蛋白質(zhì)為如下(a1)或(a2)的蛋白質(zhì)：

(a1)氨基酸序列如SEQ ID.1所示的蛋白質(zhì)；

(a2)將(a1)限定的蛋白質(zhì)的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加，且可與綿羊旋毛蟲病血清抗體特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)；

所述第二蛋白為如下(b1)或(b2)的蛋白質(zhì)：

(b1)氨基酸序列如SEQ ID.3所示的蛋白質(zhì)；

(b2)將(b1)限定的蛋白質(zhì)的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加，且可與綿羊旋毛蟲病血清抗體特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。

2.編碼權(quán)利要求1所述的第一蛋白質(zhì)或第二蛋白質(zhì)的核酸分子。

3.如權(quán)利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子是編碼權(quán)利要求1所述的第一蛋白質(zhì)或第二蛋白質(zhì)的基因，

編碼所述第一蛋白質(zhì)的基因是如下任一所述的DNA分子：

(c1)編碼序列如SEQ ID NO.2所示的DNA分子；

(c2)在嚴格條件下與(c1)限定的DNA分子雜交且編碼權(quán)利要求1所述的第一蛋白質(zhì)的DNA分子；

(c3)與(c1)或(c2)限定的DNA分子具有90％以上同源性且編碼權(quán)利要求1所述的第一蛋白的DNA分子；

編碼所述第二蛋白質(zhì)的基因是如下任一所述的DNA分子：

(d1)編碼序列如SEQ ID NO.4所示的DNA分子；

(d2)在嚴格條件下與(d1)限定的DNA分子雜交且編碼權(quán)利要求1所述的第二蛋白質(zhì)的DNA分子；

(d3)與(d1)或(d2)限定的DNA分子具有90％以上同源性且編碼權(quán)利要求1所述的第二蛋白的DNA分子。

4.權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)在制備檢測綿羊旋毛蟲病的免疫層析試紙條中的應(yīng)用，其中，所述試紙條包括底板、以及位于所述底板上依次固定連接樣品墊、結(jié)合墊、設(shè)有檢測線和質(zhì)控線的硝酸纖維素膜和吸水墊，所述檢測線靠近所述結(jié)合墊一端，所述質(zhì)控線靠近所述吸水墊一端，所述檢測線處包被有權(quán)利要求1所述的第二蛋白質(zhì)；

所述結(jié)合墊上包被有微球標記的小鼠IgG抗體和權(quán)利要求1所述的第一蛋白質(zhì)；

所述質(zhì)控線處包被有山羊抗小鼠IgG抗體。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述第一蛋白質(zhì)為在SEQ.ID.1所示的氨基酸序列的氨基末端添加6個組氨酸的蛋白；

所述第二蛋白質(zhì)為在SEQ.ID.3所示的氨基酸序列的氨基末端添加6個組氨酸的蛋白。

6.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述檢測線處抗原蛋白質(zhì)的包被濃度為2mg/mL。

7.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述結(jié)合墊中，小鼠IgG標記濃度為1mg/mL，所述第一蛋白質(zhì)的標記濃度為50μg/ml。

8.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，

所述山羊抗小鼠IgG的包被濃度為2mg/mL。