[發(fā)明專利]一種煙草支鏈淀粉酶基因及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110574105.8
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號(hào): CN113278640A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾婉俐;向海英;蔣佳芮;徐興陽;許力;黃海濤;米其利;楊文武;鄧樂樂
• 申請（專利權(quán)）人: 云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N15/56
• 分類號(hào): C12N15/56;C12N9/24;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 北京維澳專利代理有限公司 11252
• 代理人: 王立民

1.一種煙草支鏈淀粉酶基因，其特征在于，堿基序列具體如SEQ ID NO.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的煙草支鏈淀粉酶基因，其特征在于，煙草支鏈淀粉酶基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的煙草支鏈淀粉酶基因，其特征在于，煙草支鏈淀粉酶基因的PCR擴(kuò)增制備方法，包括如下步驟：

(1)提取基因組，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA備用；

(2)設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增用引物，并進(jìn)行PCR擴(kuò)增，具體引物序列設(shè)計(jì)如下：

NtGlgX-F：5’-CGCAGCATCAGGGAAAGTC-3’，

NtGlgX-R：5’-AGAAGTATCTAATGTTTTGGACTCC-3’。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的煙草支鏈淀粉酶基因，其特征在于，在步驟(1)中提取基因組時(shí)，以煙草品種紅花大金元葉片為樣品。

5.一種煙草支鏈淀粉酶基因的應(yīng)用，其特征在于，利用上述權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的煙草支鏈淀粉酶基因，該基因表達(dá)的蛋白與植物葉片中淀粉含量相關(guān)，降低該蛋白表達(dá)后，葉片中支鏈淀粉含量明顯降低。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的煙草支鏈淀粉酶基因的應(yīng)用，其特征在于，利用基因沉默技術(shù)、或者基因超表達(dá)方法，通過調(diào)節(jié)煙草支鏈淀粉酶基因的表達(dá)量，來調(diào)節(jié)控制煙葉中淀粉含量。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的煙草支鏈淀粉酶基因的應(yīng)用，其特征在于，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)、瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)或基因組編輯技術(shù)，構(gòu)建含有煙草支鏈淀粉酶基因的病毒誘導(dǎo)沉默載體、RNAi干涉載體、超表達(dá)載體或基因組編輯載體，轉(zhuǎn)化煙草，篩選獲得淀粉含量變化的煙草新品種。