[發明專利]一種煙草NUDIX水解酶基因及其應用

有效

• 申請號: 202110574079.9
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113278639B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 蔣佳芮;曾婉俐;劉欣;李雪梅;陰耕耘;米其利;翟妞;許力;楊文武;鄧樂樂
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N15/56
• 分類號: C12N15/56;C12N9/24;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 北京維澳專利代理有限公司 11252
• 代理人: 王立民

1.一種煙草NUDIX水解酶基因，其特征在于，該基因的核苷酸序列具體如SEQ?ID?NO.1所示。

2.一種煙草NUDIX水解酶，其特征在于，煙草NUDIX水解酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

3.根據權利要求1所述的煙草NUDIX水解酶基因的制備方法，其特征在于，煙草NUDIX水解酶基因的PCR擴增步驟如下：

(1)提取基因組，并反轉錄為cDNA備用；

(2)設計PCR擴增用引物，并進行PCR擴增，具體引物序列設計如下：

NtNUDX14-F：5’-GCCACGTTATGGACTTCC-3’，

NtNUDX14-R：5’-GTATGTTCTTTAACCATTGCCTG-3’。

4.根據權利要求3所述的煙草NUDIX水解酶基因的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中提取基因組時，以煙草品種紅花大金元葉片為樣品。

5.一種煙草NUDIX水解酶基因的應用，利用上述權利要求1所述的煙草NUDIX水解酶基因，其特征在于，該基因表達的蛋白與植物葉片中淀粉含量相關，降低該蛋白表達后，葉片中直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉含量明顯降低。

6.根據權利要求5所述的煙草NUDIX水解酶基因的應用，其特征在于，利用基因沉默技術或者基因超表達方法，通過調節煙草NUDIX水解酶基因的表達量，來調節控制煙葉中淀粉含量。

7.根據權利要求6所述的煙草NUDIX水解酶基因的應用，其特征在于，通過轉基因技術、瞬時表達技術或基因組編輯技術，構建含有煙草NUDIX水解酶基因的病毒誘導沉默載體、RNAi干涉載體、超表達載體或基因組編輯載體，轉化煙草，篩選獲得淀粉含量變化的煙草新品種。