[發(fā)明專利]一種從豬肝中分離的具有強(qiáng)抗氧化性和促進(jìn)脂質(zhì)代謝的多肽、制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110573710.3
• 申請(qǐng)日: 2021-05-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113307844B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史蕾;劉成陽(yáng);左常熙;逄明祝;鄭大川;李海松
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島新萬(wàn)福食品有限公司
• 主分類號(hào): C07K7/06
• 分類號(hào): C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/14;A23L33/18;A61K38/08;A61P3/10;A61P3/04
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1.一種具有強(qiáng)抗氧化性和促進(jìn)脂質(zhì)代謝的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1: SEWYREIR所示。

2.一種如權(quán)利要求1所述的一種具有強(qiáng)抗氧化性和促進(jìn)脂質(zhì)代謝的多肽的制備方法，所述制備方法包括(1)將預(yù)處理的豬肝產(chǎn)品經(jīng)生物酶分段酶解，以便獲得酶解液；(2)將所述酶解液進(jìn)行超濾分離處理，以便獲得混合肽；以及(3)將所述混合肽進(jìn)行反相高效液相色譜純化分離，以便獲得目標(biāo)肽；其中，酶解步驟為按照豬肝：水為1:1-3的比例，以重量比計(jì)，加入純凈水勻漿，用紗布過(guò)濾，分離濾液和濾渣；將濾渣重懸于1倍體積的純凈水中，反復(fù)凍融3-5次后再次勻漿過(guò)濾后收集到的濾液與第一次獲得的濾液混合獲得豬肝過(guò)濾液；將豬肝過(guò)濾液進(jìn)行微波輔助均質(zhì)，微波功率300-500W、處理5-15分鐘;處理后的均質(zhì)液冷卻到室溫后調(diào)節(jié)pH至2.0~3.0，按均質(zhì)液質(zhì)量的0.5~2%加入胃蛋白酶在25-30℃下酶解4-6h后，調(diào)節(jié)pH至6.5-7.0，按照按均質(zhì)液質(zhì)量的0.5~2%加入胰蛋白酶和中性蛋白酶，在45~55℃下攪拌酶解4~6h后升溫至80-100℃滅酶10min;

其中超濾分離處理步驟為：將酶解滅酶后的均質(zhì)液過(guò)濾后，12000-15000rpm離心10-30分鐘，收集上清液；用0.45μm的濾膜抽濾，濾液再依次利用分子量截留范圍為1000Da的超濾膜和200Da的納濾膜對(duì)其進(jìn)行超濾分離，收集分子量在200-1000Da的超濾組分，冷凍干燥后儲(chǔ)存于-80℃冰箱中；

其中反相高效液相色譜純化分離步驟為：將分子量＜1000Da的超濾組分冷凍干燥后利用超純水配置成濃度為10mg/mL，取1mL溶液上柱，柱子1.6cm×100cm，凝膠層析柱的填料為SephadexG-15葡聚糖凝膠樹(shù)脂，用蒸餾水洗脫，收集吸收峰獲得的4個(gè)洗脫組分；將收集的4個(gè)層析組分分別冷凍干燥后儲(chǔ)存于-80℃冰箱中；對(duì)獲得的4個(gè)組分進(jìn)行抗氧化能力的驗(yàn)證，選擇抗氧化能力最強(qiáng)的組分進(jìn)一步采用反相高效液相色譜方法進(jìn)行層析，再選擇其中抗氧化能力最強(qiáng)的組分進(jìn)行成分鑒定，確定氨基酸序列。

3.含有權(quán)利要求1所述的一種具有強(qiáng)抗氧化性和促進(jìn)脂質(zhì)代謝的多肽的產(chǎn)品，所述產(chǎn)品為食品或者保健品。

4.如權(quán)利要求1所述的一種具有強(qiáng)抗氧化性和促進(jìn)脂質(zhì)代謝的多肽在制備治療糖尿病和/或肥胖的藥物中的應(yīng)用。