[發明專利]共生菌組合物及其制備方法和微藻的培養方法

在審

• 申請號: 202110570827.6
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113278557A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 黃成潭;潘軍;葉蕾;黃敏
• 申請（專利權）人: 海南綠藻世界生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;C12N1/12;C12R1/145;C12R1/645;C12R1/01;C12R1/89
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

1.一種共生菌組合物，其特征在于，由海洋丁酸梭菌(Clostridium butyricum)、海洋紅酵母(Phaffia rhodozyma)和海洋紫色非硫細菌(Rhodobium marinum)組成；

海洋丁酸梭菌、海洋紅酵母與海洋紫色非硫細菌的活菌數比例為(2～4)：(5～7)：(1～3)。

2.一種共生菌組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

將海洋丁酸梭菌菌種接種于第一培養基進行第一培養，得到海洋丁酸梭菌菌液；

將海洋紅酵母菌種接種于第二培養基進行第二培養，得到海洋紅酵母菌菌液；

將海洋紫色非硫細菌菌種接種于第三培養基進行第三培養，得到海洋紫色非硫細菌菌液；

將海洋丁酸梭菌菌液、海洋紅酵母菌菌液和海洋紫色非硫細菌菌液混合，得到共生菌組合物。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述第一培養基的配方為：

第一培養的條件為：轉速500～700rpm，溫度30～35℃，培養時間24～30h；

第一培養的接種量為5％-20％；

所述第二培養基的配方為：

第二培養的條件為：轉速1000～1500rpm，溫度32～35℃，培養時間24～30h；

第二培養的接種量為5％-20％；

所述第三培養基的配方為：

第三培養的條件為：轉速100～150rpm，溫度28～35℃，培養時間48～72h；

第三培養的接種量為20％-30％。

4.根據權利要求2或3所述的制備方法，其特征在于，海洋丁酸梭菌菌液、海洋紅酵母菌菌液與海洋紫色非硫細菌菌液的體積比例為(0.2～20)：(0.5～50)：(0.1～10)。

5.權利要求2至4中任一項所述制備方法制得的共生菌組合物。

6.一種混合共生菌菌液，其特征在于，其制備方法為：靜置培養權利要求5所述的共生菌組合物，得到混合共生菌菌液。

7.根據權利要求6所述的混合共生菌菌液，其特征在于，所述靜置培養的條件為：光照強度1000～4000lux，溫度25～40℃，光暗比2:1，濕度10％～30％RH，培養時間為20～50h。

8.一種微藻的培養方法，其特征在于，將微藻、權利要求6或7所述混合共生菌菌液接種于微藻培養液中進行共培養。

9.根據權利要求8所述的培養方法，其特征在于，所述微藻培養液的配方為：硝酸鈉400～500g，磷酸二氫鉀80～100g，EDTA-2Na 8～10g，六合水三氯化鐵40～50g，冰乙酸500～600mL，清潔海水1噸；

微藻與微藻培養液的接種比例為1:(500～2000)(V/V)；

混合共生菌菌液與微藻培養液的接種比例為1:(5000～10000)(V/V)。

10.根據權利要求8或9所述的培養方法，其特征在于，共培養的條件為：溫度25-45℃，光照度5000-25000lux，培養時間24-72h；

所述微藻為海水小球藻、硅藻、微擬球藻、卵囊藻中的一種或幾種。