[發明專利]脂聯素改造的胰島細胞在改善或提高胰島移植效果中的應用

在審

• 申請號: 202110568911.4
• 申請日: 2021-05-25
• 公開（公告）號: CN113350528A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 鄭曉峰;杜曉炯;王成世;陸燕蓉
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K38/17;A61K35/39;A61P37/06;A61P29/00;A61P39/06;C12N15/861;C12N5/10
• 代理公司: 北京一枝筆知識產權代理事務所(普通合伙) 11791
• 代理人: 張慶瑞

本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及脂聯素改造使胰島細胞具有抗氧化和/或抗炎癥的特性，及胰島細胞脂聯素改造在改善或提高同種胰島移植效果中的應用。本發明在胰島移植前對胰島細胞進行脂聯素改造，使其過表達脂聯素，并具有抗氧化和抗炎癥的特性，提高了同種胰島移植的結果。在基因治療的過程中，將胰島細胞分解成單個細胞，大大提高了病毒的感染效率?；蛑委熀?，將單細胞重新被養成具有功能的細胞團，使胰島功能得到了極大的保留。

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及脂聯素改造在胰島細胞抗氧化和/或 抗炎癥中的應用，及胰島細胞脂聯素改造在改善或提高胰島移植效果中的應 用。

背景技術

胰島移植被認為是有望治療1型糖尿病(T1DM)的方法。然而，移植手 術后短期內嚴重的胰島數量和功能缺失限制了其廣泛應用。即使在同種(自 體)胰島移植這樣沒有免疫排斥的情況下，也有多達60％的植入胰島被很快 的破壞，強調了非免疫因素對調控胰島移植結果的關鍵作用。在移植后的早 期階段，胰島分離純化及缺血-再灌注所引起的的活性氧自由基和炎癥反應被 認為是造成移植早期胰島損失的主要原因。因此，在胰島移植前，對胰島進 行一定的基因改造，使其具有抗氧化和抗炎的特性非常重要。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了脂聯素改造在胰島細胞抗氧化和/或抗炎癥中的 應用，及胰島細胞脂聯素改造在改善或提高同種胰島移植效果中的應用。本 發明采用腺病毒介導的基因治療系統，在胰島移植前對胰島細胞進行脂聯素 基因改造，使其過表達脂聯素并具有抗氧化和抗炎的特性。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了脂聯素在改善或提高胰島移植效果中的應用。脂聯素(Adiponectin)是一種由脂肪細胞產生和分泌的生物活性多肽。

本發明還提供了脂聯素改造在胰島細胞抗氧化和/或抗炎癥中的應用

更重要的是，本發明還提供了胰島細胞脂聯素改造在改善或提高同種胰 島移植效果中的應用。

在本發明的一些具體實施方案中，所述脂聯素改造的胰島細胞為胰島素 細胞過表達脂聯素。

在本發明的一些具體實施方案中，基于腺病毒介導。

本發明還提供了使胰島細胞具有抗氧化和/或抗炎癥的特性，改善或提高 同種胰島移植效果的方法，包括如下步驟：

步驟1：制備分散的胰島細胞；

步驟2：經腺病毒介導，取所述胰島細胞經脂聯素改造，獲得脂聯素改造 的胰島細胞；

步驟3：取所述脂聯素改造的胰島細胞，清洗，培養，獲得胰島團。

在本發明的一些具體實施方案中，步驟1中制備分散的胰島細胞采用 0.25％的Trypsin-EDTA溶液處理。

在本發明的一些具體實施方案中，步驟2中所述胰島細胞經Ad-APN-GFP 處理。

在本發明的一些具體實施方案中，步驟3中所述清洗為采用HBSS溶液 清洗2次。

在本發明的一些具體實施方案中，步驟3中所述培養為將所述脂聯素改 造的胰島細胞以1×10⁵/ml的細胞濃度接種于無粘性培養載體中，在 RPMI-1640培養基中培養4天，直至類胰島團形成。

本發明在胰島移植前對胰島細胞進行脂聯素改造，使其過表達脂聯素， 并具有抗氧化和抗炎癥的特性，提高了同種胰島移植的結果。在基因治療的 過程中，將胰島細胞分解成單個細胞，大大提高了病毒的感染效率?；蛑?療后，將單細胞重新被養成具有功能的細胞團，是胰島功能得到了極大的保 留。

附圖說明