[發明專利]一種TCR富集克隆型及其獲取方法與應用

在審

• 申請號: 202110565989.0
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113150114A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 伊寧;薛志剛;薛金鋒;李偉林;齊凌彬;李嬋藝;呂波
• 申請（專利權）人: 湖南源品細胞生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;G01N33/68;A61K39/00;A61P31/14;A61P11/00
• 代理公司: 長沙市護航專利代理事務所(特殊普通合伙) 43220
• 代理人: 謝新苗

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體公開了一種TCR富集克隆型及其獲取方法與應用，本發明中TCR富集克隆型的氨基酸序列為CASSSGGSYIPTF_CASSLAGGHETQYF，其能夠為疫苗開發提供特異性識別的抗原表位，因此能夠用于指導疫苗開發，并為疫苗開發研究提供方向和理論依據。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，尤其涉及一種TCR富集克隆型及其獲取方法與應用。

背景技術

新型冠狀病毒(2019-novel coronavirus，2019-nCoV)感染暴發流行對全球公眾健康構成了嚴重威脅。由2019-nCoV引起的疾病被世界衛生組織(WorldHealthOrganization，WHO)正式命名為COVID-19(coronavirus disease 2019)。COVID-19在臨床上表現為肺炎、發燒、咳嗽、肌肉疼痛、疲勞、腹瀉、嚴重時導致死亡。WHO報告顯示，2019-nCoV已造成世界大流行。接種疫苗是有效預防病毒感染流行的手段，但是目前尚無新型冠狀病毒疫苗(以下簡稱新冠疫苗)。針對公共快速傳播的COVID-19病毒，目前治療手段仍以支持護理為主，針對COVID-19的抗病毒藥物、抗體、疫苗等仍在臨床實驗階段，均未研發成功。大都采用與當年SARS相同的方法對癥治療，用激素壓制免疫系統引發的炎癥反應，但這同時也會讓人體會非常脆弱，難免受到損傷。迫切需要有效的疫苗開發遏制病毒在全球爆發。

T細胞(抗原)受體(T cell receptor,TCR)為所有T細胞表面的特征性標志，以非共價鍵與CD3結合，形成TCR-CD3復合物。TCR的作用是識別抗原。TCR是由兩條不同肽鏈構成的異二聚體，由α、β兩條肽鏈組成，每條肽鏈又可分為可變區(V區)、恒定區(C區)、跨膜區和胞質區等幾部分；其特點是胞質區很短。TCR分子屬于免疫球蛋白超家族，其抗原特異性存在于V區；V區(Vα、Vβ)又各有三個高變區CDR1、CDR2、CDR3，其中以CDR3變異最大，直接決定了TCR的抗原結合特異性。在TCR識別MHC-抗原肽復合體時，CDR1，CDR2識別和結合MHC分子抗原結合槽的側壁，而CDR3直接與抗原肽相結合。

發明內容

為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供了一種TCR富集克隆型及其獲取方法與應用。

為了實現上述目的，本發明公開了TCR富集克隆型，所述TCR富集克隆型的氨基酸序列為：CASSSGGSYIPTF_CASSLAGGHETQYF。

本發明還公開了上述TCR富集克隆型的獲取方法，包括以下步驟：

S1、采集治愈后病毒性感染患者的外周血單個核細胞樣本；

S2、對所采集的樣本進行TCR/BCR V(D)J免疫組庫測序分析，找到共有的CDR3可變區；

S3、對治愈后病毒性感染患者富集程度高的細胞克隆型分布進行檢測，從而可獲得TCR富集克隆型。

其中，所述TCR富集克隆型在效應CD4+T記憶細胞的細胞簇中富集。

本發明還公開了所述的TCR富集克隆型在指導疫苗開發中的應用。

其中，所述疫苗為2019-nCoV疫苗。

有益技術效果：本發明中的TCR富集克隆型的氨基酸序列為CASSSGGSYIPTF_CASSLAGGHETQYF，所述TCR富集克隆型通過共有CDR3可變區對特異性識別的抗原表位具有積極意義，從而能夠用于指導疫苗開發，為疫苗開發研究提供方向和理論依據。

附圖說明

圖1是本發明中一種TCR富集克隆型獲取方法的流程圖；

圖2是本發明中TCR富集克隆型所處位置及其在TCR細胞中富集程度的示意圖；

圖3為免疫細胞亞群鑒定中所選用的分子標志物以及最終鑒定的免疫細胞亞群結果；