[發明專利]子宮內膜分泌期不同時間點的標志分子及其篩選方法

在審

• 申請號: 202110565805.0
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113295815A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 顏桂軍;孫海翔;劉洋;曹志文;李東
• 申請（專利權）人: 南京鼓樓醫院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 梁天彥

本發明公開了人子宮內膜組織分泌期不同時間點(包括分泌早、中和晚期：LH_2、LH_5、LH_7、LH_9、LH10和LH_12，注射hCG當日計為LH_0)的蛋白提取和處理過程，并進行蛋白質譜和磷酸化修飾質譜，獲得分泌期不同時間點的分子表達模式，該分子表達模式可為進一步了解人子宮內膜組織分泌期動態變化提供依據，并有利于子宮內膜植入窗口期的判斷和指導輔助生殖技術中的胚胎移植時間。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及子宮內膜分泌期不同時間點的分子變化及其篩選方法。

背景技術

生殖健康不僅關系出生人口的數量和質量，也關乎國計民生。據世界衛生組織統計，全球育齡人口生殖問題日漸凸顯。雖然輔助生殖技術的出現一定程度上緩解了人類生育力降低的問題，但體外受精-胚胎移植的成功率在世界范圍內一直徘徊在50％左右，其中胚胎植入失敗是瓶頸因素。

良好的子宮內膜是胚胎成功植入的先決條件，處于容受狀態的分泌中期子宮內膜能促進胚胎和內膜的相互識別，利于胚胎著床。然而，迄今為止并沒有一個能被臨床廣泛接受的分泌期子宮內膜的分子變化圖譜。因此，明確分泌期子宮內膜的分子動態變化，并進一步分析調控容受態建立的分子機制，探索一種精準有效的方式來評估子宮內膜容受性和胚胎移植的最佳時間，對改善臨床結局意義重大。

如中國專利202010363060.5公開了一組子宮內膜受容性的生物標志物、其篩選方法及應用，可鑒定5213個可信蛋白，與妊娠陽性組相比，妊娠陰性組中鑒定到的1.3倍以上表達的差異蛋白共84個，其中上調蛋白17個，下調蛋白67個，該發明還公開了上述子宮內膜受容性的生物標志物的篩選方法及應用。但該方法無法獲知分泌期子宮內膜的分子變化情況，該方法只有一個時間且只有蛋白組水平，本申請包含從分泌早期至分泌晚期的6個時間點，并包括了蛋白組學和磷酸化修飾組學兩個維度。

由于蛋白質是發揮生物功能的基本單位，而蛋白的磷酸化修飾在調節蛋白功能方面意義重大。本申請收集分泌期不同時間點(LH_2、LH_5、LH_7、LH_9、LH_10和LH_12，注射hCG當日計為LH_0)人子宮內膜組織，并進行蛋白質譜和磷酸化修飾質譜，獲得分泌期不同時間點的分子表達特征，該分子表達模式可為進一步了解人子宮內膜組織分泌期動態變化提供依據，從分子水平揭示了人分泌期子宮內膜的動態變化特征，有利于進一步理解分泌期子宮內膜的生理改變，使得精準判斷植入窗口期成為可能，利于提高輔助生殖技術的成功率，減輕患者負擔和社會壓力。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一組子宮內膜分泌期不同時間點的標志分子及其篩選方法。

為實現上述目的，首先，本發明提供了一組子宮內膜分泌期不同時間點的標志分子，具體如下：

(1)LH_5與LH_2兩組內膜間的差異表達蛋白和磷酸化修飾位點

1)差異蛋白