[發明專利]一種白肉靈芝Z160097及其栽培方法和應用

在審

• 申請號: 202110565264.1
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN113122458A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 梁曉薇;黃龍花;劉遠超;胡惠萍;吳曉賢;卓麗君;莫偉鵬
• 申請（專利權）人: 廣東省科學院微生物研究所（廣東省微生物分析檢測中心）
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01G18/00;A01G18/40;A01G18/20;A01G18/70;C08B37/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;朱聰聰

本發明公開了一種白肉靈芝Z160097及其栽培方法和應用。本發明的白肉靈芝(Ganoderma leucocontextum)Z160097于2020年4月22日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(GDMCC)，地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏編號為：GDMCC No：60965。野生白肉靈芝Z160097是分布范圍極小的新物種，其的快速準確鑒定將為其產業化開發和產權保護奠定基礎。

本申請是專利申請號：202010530800.X，發明名稱：白肉靈芝Z160097的特征性核苷酸序列及其特異引物、試劑盒和鑒別方法，申請日：2020年6月11日的專利申請的分案申請。

技術領域：

本發明屬于分子生物學技術領域，具體涉及一種白肉靈芝Z160097及其栽培方法和應用。

背景技術：

靈芝是著名的藥用真菌之一，千百年來一直被民間視為仙草，被歷代醫藥家視為延年益壽、滋補強健、扶正固本的神奇珍品，經過大量臨床研究，靈芝具有調節免疫、防治心血管系統疾病、抗腫瘤、保肝解毒、抗神經衰弱、降血糖等功效。靈芝屬(Ganoderma)是由芬蘭植物學家P.Karsten于1881年建立的，并以靈芝G.1ucidum(W.Cur.Fr.)Karst.作為本屬的代表種。白肉靈芝(Ganoderma leucocontextum)是新發現的靈芝屬中國特有種(Li etal.,2014)，是本專利發明人之一的胡惠萍等人于2011年在調查西藏林芝地區的野生食藥用菌資源時，采集到的生長在青岡樹(Cyclobalanopsisglauca)上的野生靈芝。通常夏秋季散生至群生于青岡樹腐木上，靠近樹干基部，分布于西藏與四川等西南地區，可藥用，目前藥材市場上與靈芝(俗稱赤芝)(G.lingzhi)混淆使用。白肉靈芝在形態特征上與靈芝、亮蓋靈芝/漆光靈芝(G.lucidum)和四川靈芝(G.sichuanense)等均較相似，因此在沒有被定為靈芝屬新種之前，在四川和西藏等地，采集、收購和售賣靈芝的采集者和商販稱之為“白肉靈芝”、“白靈芝”、“藏白芝”或“藏白靈芝”，在當地被視為高品質的種類，售價往往比一般的靈芝高數倍。白肉靈芝的多糖含量比普通靈芝高2-4倍，靈芝三萜含量達到普通品種120％以上，動物實驗及細胞實驗都表明其具有強烈的抑制腫瘤的作用。這一特點讓白肉靈芝的批發價每斤一般可達400元，大約是內地普通靈芝價格的6-8倍。

野生白肉靈芝Z160097栽培性狀穩定良好，活性成分含量高，并且擁有自主產權，具有極好的開發利用價值。因此，快速且準確地鑒別野生白肉靈芝Z160097的方法和技術是優質野生白肉靈芝菌株商業化生產的重要技術保障，對其的開發利用具有重要的意義。

DNA是生物遺傳信息的載體，每個生物物種乃至個體均具有獨特的特征性核苷酸序列，且具有一定的穩定性，不會受到環境或培養等條件的影響而改變，是該生物物種或個體區別于其它生物物種或個體的重要標志，因而是用來鑒定物種或個體的可靠依據。隨著分子生物學技術的快速發展，真菌的快速準確檢測鑒定已成為可能。目前常用的分子標記鑒定方法主要有RAPD、AFLP、RFLP、rDNA序列分析和特異性引物的PCR檢測等。本發明旨在應用各種分子標記找到目標菌株的特異條帶，并進行克隆測序，再設計特異引物，從而找到目標菌株專有的特征性核苷酸，建立目標菌株的快速準確鑒定技術方法。目前，已有部分用于鑒定真菌菌株的核苷酸特征序列獲得專利，但由于野生白肉靈芝Z160097是分布范圍極小的新物種，其快速準確鑒定將為其產業化開發和產權保護奠定基礎。

發明內容：

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供白肉靈芝Z160097的特征性核苷酸序列及其特異引物、試劑盒和鑒別方法。

本發明的第一個目的是提供一種用于鑒別白肉靈芝Z160097的特征性核苷酸序列，所述的特征性核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

本發明的第二個目的是提供一種用于鑒別白肉靈芝Z160097的特異引物，所述的特異引物如下所示：