[發明專利]一種利用酶提取桑葉功能成分的方法

有效

• 申請號: 202110563357.0
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113249359B
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發明（設計）人: 郝林;李倩倩;郝利平
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N9/18;C12N9/26;C12N9/88;C12N1/14;A23L33/105;A23L5/00;A61K8/9789;A61Q19/08;C12R1/645
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理有限公司 11562
• 代理人: 張雪

本發明公開了一種利用酶提取桑葉功能成分的方法，屬于酶技術領域。本發明公開了一種制備纖維素酶粗酶液以及果膠酶粗酶液的方法，包括以下步驟：制備PDA斜面培養基；制備產纖維素酶或果膠酶發酵培養基；固體菌種的制備；發酵；纖維素酶粗酶液及果膠酶粗酶液的制備。本發明還公開了一種桑葉濃縮液的制備方法，包括以下步驟：酶解、滅酶、濃縮。本發明還公開了將桑葉濃縮液制備成桑葉產品的技術方案。本發明通過木耳母種制得的纖維素酶和果膠酶更加安全可靠；本發明提高了桑葉中蛋白及其他功能性成分的含量和得率；本發明所制得的桑葉產品可直接應用于食品、保健產品和化妝品的加工生產，提高了桑葉原料的綜合利用率。

技術領域

本發明涉及酶技術領域，特別是涉及一種利用酶提取桑葉功能成分的方法。

背景技術

桑葉既可藥用亦可食用，《本草新編》中寫道：桑葉之功，更佳于桑皮，最善補骨中之髓、添腎中之精，止身中之汗，填腦明目，活血生津，種子安胎，調和血脈，通利關節。近年來，對桑葉的研究發現，桑葉中富含多種功能成分，如多糖、生物堿和黃酮等，具有降血糖、降血壓、降血脂、增強免疫力、去黑色素以及美白等多種功能。桑葉作為藥食同源的植物，具有突出的保健功能，然而目前開發利用十分有限?，F有技術對于桑葉功能成分提取的含量和得率較低，比如朱天明等人(纖維素酶輔助提取桑葉中葉蛋白的工藝)研究了利用纖維素酶輔助提取桑葉中的蛋白，其桑葉蛋白的提取率為僅6.5g/100g，因此，需要研發一種新的提取工藝來提高桑葉產品中功能成分的含量和得率。

同時，現有技術中用于桑葉成分提取的纖維素酶與果膠酶主要來自于真菌，比較典型的有木霉屬、曲霉屬和青霉屬。不可避免的是木霉屬和青霉屬在發酵生產酶的過程中會伴隨產生毒素，即使是安全性比較高的曲霉屬在生產酶的過程中也時常會伴隨微量不確定的有害物質的產生，后期分離脫毒工藝復雜，難度很大；同時，在后期酶處理桑葉得到的漿液時，需要經過濃縮過程，導致即使是微量的有害物質也會因濃縮使含量增加。因此，如何確保在食品及藥品生產中使用的纖維素酶和果膠酶的食用安全性，是目前亟需解決的技術難題。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用酶提取桑葉功能成分的方法，以解決上述現有技術存在的問題，一方面使纖維素酶和果膠酶整個制備過程不產生任何毒素及有害物質，更加安全可靠，保證人們食用的安全性；另一方面利用纖維素酶和果膠酶對桑葉中功能成分進行提取，來提高桑葉產品中功能成分的含量和得率。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明目的之一是提供一種制備纖維素酶粗酶液的方法，包括以下步驟：

步驟1，制備PDA斜面培養基；

步驟2，制備產纖維素酶發酵培養基：將麩皮、秸稈粉、硫酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣和水混合均勻，滅菌，得到產纖維素酶發酵培養基；

步驟3，固體菌種的制備：將木耳母種接入PDA斜面培養基培養，得到菌絲；

步驟4，發酵：取所述菌絲接入到所述產纖維素酶發酵培養基中拌勻，培養；

步驟5，纖維素酶粗酶液的制備：取步驟4中培養好的產纖維素酶發酵培養基，加水震蕩、靜置、過濾、離心，得到纖維素酶粗酶液。

進一步地，步驟2中麩皮、秸稈粉、硫酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣和水混合均勻后的pH值為3.5-5。

進一步地，步驟2中麩皮、秸稈粉、硫酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、氯化鈣和水的質量比為562.5:437.5:40:3:1:1:1500。

進一步地，步驟4中所述培養的溫度為25-32℃，時間為3-4天。

本發明目的之二是提供一種制備果膠酶粗酶液的方法，包括以下步驟：

步驟1，制備PDA斜面培養基；