[發明專利]一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202110562652.4
• 申請日: 2021-05-24
• 公開（公告）號: CN113123120B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 龔逸鴻;曹聰;羅語溪;李燕;葉浩;劉海東;鄭毓靈;歐金淼;韋秋君
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: D06M10/00
• 分類號: D06M10/00;D06M15/61;D06M15/15;C12N5/00;D06M101/32
• 代理公司: 深圳市創富知識產權代理有限公司 44367
• 代理人: 高冰

1.一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、在低氧或無氧環境下，將PET纖維材料油浴加熱至130-150℃的結晶溫度熱處理2-4h，使其結晶充分；

S2、將熱處理后的PET纖維材料浸泡在多巴胺溶液中，待溶劑揮發后，使黏附在PET材料上的多巴胺在弱堿環境下發生氧化作用自聚成聚多巴胺顆粒，使熱處理后的PET纖維材料表面附著聚多巴胺顆粒，引入氨基反應位點；

S3、將步驟S2的PET纖維材料浸泡在由明膠溶液和京尼平溶液組成的混合溶液中，35-40℃下水浴處理25-35 min，期間震蕩多次，隨后在35-40℃下靜置處理10-15 h，通過京尼平的偶聯作用，將明膠大分子固定在步驟S2的PET纖維材料表面，制備得到PET細胞載體。

2.根據權利要求1所述的一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法，其特征在于，步驟S2具體為：將熱處理后的PET纖維材料浸泡在4-6 mg/mL的多巴胺溶液中，緩慢振蕩2-4h，待溶劑揮發后，加入pH=8-9的Tris溶液浸沒PET，避光處理7-9 h后用水清洗即可。

3.根據權利要求2所述的一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法，其特征在于，步驟S2具體為：將熱處理后的PET纖維材料浸泡在5 mg/mL的多巴胺溶液中，緩慢振蕩3 h，待溶劑揮發后，加入pH=8.8的Tris溶液浸沒PET，避光處理8 h后用水清洗即可。

4.根據權利要求1所述的一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法，其特征在于，步驟S3具體為：將步驟S2的PET纖維材料浸泡在由明膠溶液和京尼平溶液組成的混合溶液中，37℃下水浴處理30 min，每5分鐘震蕩1次，隨后在37℃下靜置處理12 h。

5.根據權利要求4所述的一種可耐高溫滅菌的PET細胞載體的制備方法，其特征在于，所述明膠在明膠溶液中的質量濃度為8-12%，所述京尼平在京尼平溶液中的質量濃度為0.5-2%，所述明膠溶液和京尼平溶液的混合體積比為1:1。

6.采用權利要求1-5任一項所述的方法制備得到的可耐高溫滅菌的PET細胞載體。

7.權利要求6所述的可耐高溫滅菌的PET細胞載體在細胞培養中的應用。