[發(fā)明專(zhuān)利]一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110562356.4
• 申請(qǐng)日: 2021-05-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113337515B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 岳遠(yuǎn)征;劉家偉;王良桂;楊秀蓮;陳貢偉;施婷婷
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/29
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/29;C12N15/82;C07K14/415;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 南京申云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

本發(fā)明公開(kāi)了一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因及其應(yīng)用，屬于植物分子生物學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明基于前期研究和生物信息學(xué)分析軟件初步預(yù)測(cè)了該基因的功能。通過(guò)克隆得到基因序列的全長(zhǎng)，在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了超表達(dá)載體并進(jìn)行大花煙草的遺傳轉(zhuǎn)化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在篩選培養(yǎng)基上生長(zhǎng)35d后，外植體可快速出芽，而且出芽率顯著高于CK，表明ofWOX2在脫分化方面發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。作為愈傷組織分化不定芽過(guò)程中重要轉(zhuǎn)錄因子ofWOX2基因，可以用于基因工程中一些難以脫分化的植物，具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種日香桂(Osmanthus fragranscv.′rixianggui′)快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

WOX轉(zhuǎn)錄因子家族是植物特有的一類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子家族，參與了干細(xì)胞調(diào)控、胚胎發(fā)育、植物組織器官的發(fā)生和形成等過(guò)程，對(duì)植物的發(fā)育過(guò)程有十分重要的生物學(xué)意義。相關(guān)研究表明，WOX轉(zhuǎn)錄因子可以促使植物干細(xì)胞的分裂分化。桂花作為中國(guó)重要的觀(guān)賞樹(shù)種，兼有生態(tài)效益、社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，但一直未見(jiàn)其遺傳轉(zhuǎn)化體系的報(bào)道，主要原因是愈傷組織分化不定芽這一過(guò)程較難突破。

隨著桂花全基因的公布，為研究人員從分子生物學(xué)的角度研究桂花難以脫分化這一難題提供了便利。研究發(fā)掘桂花基因組中有關(guān)細(xì)胞分化及分裂的重要相關(guān)基因，很可能會(huì)對(duì)桂花的遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立有重要促進(jìn)作用。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問(wèn)題在于提供所述日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因的具體應(yīng)用。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因的表達(dá)蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

含有所述日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因的載體或宿主菌。

進(jìn)一步地，所述的載體是植物重組表達(dá)載體。

進(jìn)一步地，所述的植物重組表達(dá)載體具體為pBI121-ofWOX2。

所述日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因在植物脫分化中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，所述的應(yīng)用包括以下步驟：

1)構(gòu)建所述日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因的載體；

2)將所構(gòu)建的載體轉(zhuǎn)化到植物或植物細(xì)胞中；

3)培育獲得轉(zhuǎn)基因植物的植株；

4)利用植株的全部或部分組織進(jìn)行培養(yǎng)，獲得愈傷組織或芽。

進(jìn)一步地，所述植物為日香桂或煙草。

相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明提供的一種日香桂快速脫分化相關(guān)ofWOX2基因，是一種轉(zhuǎn)錄因子基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明基于前期研究和生物信息學(xué)分析軟件初步預(yù)測(cè)了該基因的功能。通過(guò)克隆得到基因序列的全長(zhǎng)，在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了超表達(dá)載體并進(jìn)行大花煙草的遺傳轉(zhuǎn)化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在篩選培養(yǎng)基上生長(zhǎng)35d后，外植體可快速出芽，而且出芽率顯著高于CK，表明ofWOX2在脫分化方面發(fā)揮了重要的調(diào)控作用。作為愈傷組織分化不定芽過(guò)程中重要轉(zhuǎn)錄因子ofWOX2基因，可以用于基因工程中一些難以脫分化的植物，具有重要實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

附圖說(shuō)明

圖1為目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖；