[發明專利]用于消除免疫檢測內源性干擾的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202110558183.9
• 申請日: 2021-05-21
• 公開（公告）號: CN113295860A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 熊雨勝;張薇;周歡
• 申請（專利權）人: 武漢原谷生物科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/68
• 代理公司: 湖北天領艾匹律師事務所 42252
• 代理人: 王能德

本發明具體公開了一種用于消除免疫檢測內源性干擾的試劑盒及其應用，所述試劑盒包括磁微粒及偶聯在磁微粒上的去干擾蛋白，去干擾蛋白包括抗人IgM，抗人IgG，抗人IgA、抗人IgE、抗人IgD、抗異嗜性抗體及抗類風濕因子抗體中的一種或多種，用于消除內源性干擾。本發明提供的試劑盒相比于市面上的去除內源性干擾的阻斷劑，去干擾更加全面，去干擾更加徹底；此外不會降低正常樣本抗原檢測的信號值，對樣本檢測不會有不良影響。

技術領域

本發明涉及免疫檢測技術領域，特別涉及一種用于消除免疫檢測內源性干擾的試劑盒及其應用。

背景技術

臨床上，出現檢驗結果和患者臨床不符的情況時有發現，導致檢驗結果與臨床不符合的原因是多樣性的，包括患者檢查前是否用藥，是否處于窗口期，檢驗方法的局限性等等，甚至可能是患者自身某些固有干擾導致的。其中患者自身固有的內源性干擾就是最容易被忽視的影響因素。內源性干擾是由于檢測試劑中的抗體和患者樣本中的內源性物質發生交叉反應所致，這類干擾統稱為內源性干擾。其中內源性干擾主要分為以下幾類：

1.類風濕因子：類風濕因子是存在于血清中的一類以自身變性IgG為靶抗原的自身抗體，與天然IgG結合能力較差，易與人和動物的變性IgG或免疫復合物中的IgG結合。

2.異嗜性抗體(HA)：異嗜性抗體可以與許多動物免疫球蛋白的Fc和Fab等部位上的表位結合，模擬被測抗原的免疫活性，同時結合捕獲抗體、標記抗體干擾實驗。

3.人抗動物抗體(HAAA)：人抗動物抗體是具有抗動物活性的抗體。

去除這些內源性干擾，目前市面上最主流的做法是加入各種類型的阻斷劑。阻斷劑類型多種多樣，根據阻斷劑作用機制分類有被動阻斷劑和主動阻斷劑。被動阻斷劑一般為正常動物血清或正常動物IgG，其工作原理為通過高濃度添加，使干擾抗體優先與阻斷劑結合而不與檢測抗體或捕獲抗體結合，從而降低干擾；主動阻斷劑，一類對干擾抗體具有高親和力的試劑。與干擾抗體結合后，可以通過位阻效應阻斷干擾抗體與檢測抗體或捕獲抗體的結合。

由于臨床樣本具有特殊性，干擾類型不一，干擾千差萬別，各類阻斷劑針對的樣本類型并非完全一致。目前并沒有一種單一配方的阻斷劑適用于所有的免疫檢測，相關開發人員只能根據自己免疫檢測系統的情況，添加一種或幾種阻斷劑，達到去除干擾的目的。

本發明使用磁珠與免疫球蛋白及去干擾物質連接，為一類根據血清及待檢物性質特定配置的含多種抗體的磁珠液，可以用于完全去除樣本中的干擾物。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于消除免疫檢測內源性干擾的試劑盒，用以解決樣本特殊性的問題，可以將免疫檢測中的干擾物質全部去除。

鑒于此，本發明的技術方案如下：

一種用于消除免疫檢測干擾的試劑盒，包括磁微粒、分別偶聯在磁微粒上的去干擾蛋白及保存緩沖液；所述去干擾蛋白選自抗人IgM、抗人IgG、抗人IgA、抗人IgE、抗人IgD、抗異嗜性抗體及抗類風濕因子抗體中的多種。

根據本發明的實施例，所述去干擾蛋白為單克隆抗體和/或多克隆抗體。

根據本發明的實施例，所述磁微粒為羧基末端的磁性微粒。

本發明還提供以上所述的試劑盒在制備免疫檢測產品中的應用。

本發明還提供以上所述試劑盒的制備方法，包括如下步驟：

1)取磁微粒，磁性分離去上清，加入溶解在偶聯緩沖液的去干擾蛋白，置于空氣振蕩器中反應，磁性分離后去上清；

2)封閉未偶聯的磁珠，磁性分離，去上清；

3)將分別偶聯的不同種類去干擾蛋白的磁珠均勻地混合，磁性分離去上清；使用保存緩沖液保存。