[發(fā)明專(zhuān)利]TIMM21突變基因、檢測(cè)其的引物、試劑盒和方法以及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110556490.3
• 申請(qǐng)日: 2021-05-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113265409B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王開(kāi)宇;馬鑫瑞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京福君基因生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/52
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/52;C12N9/00;C12N15/11;C12Q1/6883
• 代理公司: 福州創(chuàng)蔚來(lái)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35290
• 代理人: 鄭艷艷

1.一種突變TIMM21基因或突變TIMM21蛋白，其特征在于：所述突變TIMM21基因與人類(lèi)基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

18號(hào)染色體物理位置為71816137的堿基由A突變?yōu)門(mén)、18號(hào)染色體物理位置為71822624的堿基由A突變?yōu)門(mén)；

所述突變TIMM21基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.94AT、c.448AT；

所述突變TIMM21蛋白的序列與SEQ ID NO.2的序列相比具有以下突變中的至少一種：

p.Lys32Ter、p.Arg150Ter。

2.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述的突變TIMM21基因或突變TIMM21蛋白的方法，所述方法用于非診斷目的，其特征在于：所述方法包括檢測(cè)TIMM21基因或TIMM21蛋白中是否存在突變位點(diǎn)，所述突變位點(diǎn)為如下至少一種：

Chr18(GRCh37):g.71816137AT，cDNA序列發(fā)生c.94AT，p.Lys32Ter；

Chr18(GRCh37):g.71822624AT，cDNA序列發(fā)生c.448AT，p.Arg150Ter。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法包括利用如下至少一組引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增的步驟：

SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序包括：94-100℃，1-10min；94-95℃，3-5min，95-96℃，25-30s，58-60℃，25-30s，循環(huán)30-40次，70-72℃，1-10min。

5.一種檢測(cè)突變TIMM21基因的試劑，其特征在于：所述試劑為核酸檢測(cè)探針或引物；

所述核酸檢測(cè)探針與突變TIMM21基因互補(bǔ)；所述突變TIMM21基因與人類(lèi)基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

18號(hào)染色體物理位置為71816137的堿基由A突變?yōu)門(mén)、18號(hào)染色體物理位置為71822624的堿基由A突變?yōu)門(mén)；

所述突變TIMM21基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.94AT、c.448AT；

所述核酸檢測(cè)探針與突變TIMM21基因互補(bǔ)的區(qū)域包括選自如下至少一種的物理位置或cDNA序列位置：

物理位置第71816137位、第71822624位；cDNA序列第94位、第448位；

所述引物為具有如下序列的至少一組引物：

SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；

SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。

6.一種檢測(cè)突變TIMM21基因的試劑盒，其特征在于：它包括權(quán)利要求5所述的試劑。

7.一種檢測(cè)突變TIMM21基因或突變TIMM21蛋白的試劑在制備嬰兒致死性線粒體疾病檢測(cè)試劑中的應(yīng)用；

所述突變TIMM21基因與人類(lèi)基因組參考序列GRCh37相比具有以下突變中的至少一種：

18號(hào)染色體物理位置為71816137的堿基由A突變?yōu)門(mén)、18號(hào)染色體物理位置為71822624的堿基由A突變?yōu)門(mén)；

所述突變TIMM21基因的cDNA序列與SEQ ID NO.1的序列相比具有如下突變中的至少一種：

c.94AT、c.448AT；

所述突變TIMM21蛋白的序列與SEQ ID NO.2的序列相比具有以下突變中的至少一種：

p.Lys32Ter、p.Arg150Ter。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述嬰兒致死性線粒體疾病檢測(cè)試劑為基因芯片用試劑、DNA擴(kuò)增用試劑、反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增用試劑、限制性?xún)?nèi)切酶酶切方法用試劑或測(cè)序用試劑。