[發明專利]一種巨大血小板綜合征的斑馬魚模型

有效

• 申請號: 202110554302.3
• 申請日: 2021-05-20
• 公開（公告）號: CN113355326B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 張譯月;林青;周日陽;孟盼盼;吳亮亮
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;A01K67/027
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍;江裕強

本發明公開了一種巨大血小板綜合征的斑馬魚模型。該斑馬魚模型為gp9^SMU15突變體斑馬魚。本發明中首次發現了斑馬魚上gp9突變與血小板的增殖有關，該斑馬魚gp9^SMU15突變體具有與人類似的巨大血小板綜合征的癥狀，并證明該gp9^SMU15突變體斑馬魚凝血功能障礙。另外，本發明根據該斑馬魚模型首次建立了血小板減少，凝血功能障礙的Bernard?Soulier Syndrome疾病模型，該斑馬魚模型可成為研究Bernard?Soulier Syndrome疾病及藥物篩選的新載體。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及研究血小板發育研究領域，具體涉及一種巨大血小板綜合征的斑馬魚模型。

背景技術

血小板是血液系統中主要的組成部分。當血管破損時，血小板起到了止血和凝血的作用。當血小板數目減少或者功能減退，會導致機體止血功能障礙和血栓形成不良，并且引發相關的血小板疾病。巨大血小板綜合征,又稱Bernard-Soulier Syndrome,一種罕見的遺傳性出血性疾病，其發病率不足1/100萬，主要是由于血小板膜上的糖蛋白復合體GPIb-IX-V的合成和表達缺陷或者其中任一亞基GPIb，GPIX和GPV的基因缺陷所導致。GPIb-IX-V的缺陷導致血小板不能正常粘附到血管內皮上而導致皮膚，黏膜出血或者內臟出血，出血輕重不一。病人的外周血中會出現巨大的血小板且輕度或中度的血小板數目的減少。(AnnaSavoia,Annalisa Pastore,Daniela De Rocco,et al.(2011).Clinical and geneticaspects of Bernard-Soulier syndrome:searching for genotype/phenotypecorrelations.Haematologica 96(3):417-423).在老鼠的模型中，外周血中血小板的形態也出現了異常，能形成偽足樣的血小板(偏成熟的血小板)數目減少，說明GPIb-IX-V對血小板的形態的維持和成熟發揮了重要的作用。(C.Strassel,C.Nonne,A.Eckly,T.David,C.Leon,et al.(2007).Decreased Thrombotic Tendency in Mouse Models of theBernard-Soulier Syndrome.ArteriosclerThrombVasc Biol.27:241-247).在13例Bernard-Soulier病例報導中，發現有7例GPIX這一基因的錯義突變的病人。

為了更好地研究GPIX在血小板中的作用以及Bernard-Soulier Syndrome巨大血小板的發病機制，需要觀察胚胎的發育和大規模的藥物篩選。因此，需要建立一種相關的動物模型。

發明內容

為了克服現有技術存在的不足，本發明的目的是提供一種巨大血小板綜合征的斑馬魚模型。本發明提供的巨大血小板綜合征的斑馬魚模型是一種GPIX基因突變致血小板減少的斑馬魚模型。

本發明為了更好地研究gp9在早期發育血小板中的作用以及相關的調控機制，構了建斑馬魚突變體gp9并應用于制備相應的疾病模型(巨大血小板綜合征的斑馬魚模型)。由于斑馬魚產卵高，體外受精，早期胚胎發育透明的特性，有利于觀察血小板的行為變化。同時，也有利于一些治療巨大血小板綜合征的大規模藥物篩選。

本發明的目的在于提供一種巨大血小板綜合征的斑馬魚模型。本發明提供的GPIX基因突變致血小板減少斑馬魚模型可以應用于Bernard-Soulier巨大血小板綜合征發病機制的研究。

本發明的目的至少通過如下技術方案之一實現。

本發明提供的巨大血小板綜合征的斑馬魚模型，該斑馬魚模型為gp9^SMU15突變體斑馬魚。

進一步地，gp9^SMU15突變體斑馬魚的表型是由GP9基因異常表達引起，即由gp9^SMU15突變引起。