[發(fā)明專利]一種核酸適配體及其在檢測免疫抑制劑中的應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110553740.8 | 申請日： | 2021-05-20 |
| 公開（公告）號： | CN113444728A | 公開（公告）日： | 2021-09-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 不公告發(fā)明人 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海奧根診斷技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/115 | 分類號： | C12N15/115;G01N33/53;G01N33/58 |
| 代理公司： | 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250 | 代理人： | 張均瑩 |
| 地址： | 201114 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 核酸 適配體 及其 檢測 免疫抑制劑 中的 應(yīng)用 | ||
1.一種核酸適配體，其特征在于，所述核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:1、SEQID NO:2和SEQ ID NO:3中的至少一種。
2.如權(quán)利要求1所述的一種核酸適配體，其特征在于，所述核酸適配體上修飾有熒光標(biāo)記。
3.如權(quán)利要求2所述的一種核酸適配體，其特征在于，當(dāng)核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:1時，所述熒光標(biāo)記為FAM標(biāo)記；當(dāng)核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:2時，所述熒光標(biāo)記為VIC標(biāo)記；當(dāng)核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:3時，所述熒光標(biāo)記為ROX標(biāo)記。
4.一種用于檢測免疫抑制劑的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品包括氧化石墨烯以及權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的核酸適配體，或者，所述產(chǎn)品包括納米金以及權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的核酸適配體，或者，所述產(chǎn)品包括氧化石墨烯、納米金以及權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的核酸適配體。
5.如權(quán)利要求4所述的一種用于檢測免疫抑制劑的產(chǎn)品，其特征在于，所述免疫抑制劑包括他克莫司、環(huán)孢素A和霉酚酸酯中的至少一種。
6.如權(quán)利要求5所述的一種用于檢測免疫抑制劑的產(chǎn)品，其特征在于，當(dāng)免疫抑制劑為他克莫司時，所述核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:1；當(dāng)免疫抑制劑為環(huán)孢素A時，所述核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:2；當(dāng)免疫抑制劑為霉酚酸酯時，所述核酸適配體的核苷酸序列為SEQ ID NO:3。
7.一種檢測樣本中免疫抑制劑濃度的方法，其特征在于，所述方法包含如下步驟：
孵育步驟：將權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的核酸適配體和待測樣本混合后孵育，得到孵育液；將氧化石墨烯和孵育液混合后孵育，得到待測體系；
檢測步驟：分別檢測孵育液和待測體系的熒光強(qiáng)度；根據(jù)孵育液和待測體系的熒光強(qiáng)度變化，以及，熒光強(qiáng)度變化與免疫抑制劑濃度之間的線性關(guān)系，計算得到待測樣本中免疫抑制劑的濃度。
8.如權(quán)利要求7所述的一種檢測樣本中免疫抑制劑濃度的方法，其特征在于，所述免疫抑制劑包括他克莫司、環(huán)孢素A和霉酚酸酯中的至少一種；
當(dāng)免疫抑制劑為他克莫司時，所述熒光強(qiáng)度變化與免疫抑制劑濃度之間的線性關(guān)系為Y＝0.7144X-0.1389，式中，X為免疫抑制劑濃度，Y為加入待測體系熒光強(qiáng)度與孵育液熒光強(qiáng)度的比值；
當(dāng)免疫抑制劑為環(huán)孢素A時，所述熒光強(qiáng)度變化與免疫抑制劑濃度之間的線性關(guān)系為Y＝0.8921X-0.1423，式中，X為免疫抑制劑濃度，Y為加入待測體系熒光強(qiáng)度與孵育液熒光強(qiáng)度的比值；
當(dāng)免疫抑制劑為霉酚酸酯時，所述熒光強(qiáng)度變化與免疫抑制劑濃度之間的線性關(guān)系為Y＝0.9124X-0.2322，式中，X為免疫抑制劑濃度，Y為加入待測體系熒光強(qiáng)度與孵育液熒光強(qiáng)度的比值。
9.如權(quán)利要求7或8所述的一種檢測樣本中免疫抑制劑濃度的方法，其特征在于，所述孵育的條件為：避光，20～30℃，15～45min。
10.權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的核酸適配體、權(quán)利要求4～6任一項(xiàng)所述的產(chǎn)品或權(quán)利要求7～9任一項(xiàng)所述的方法在免疫抑制劑濃度檢測中的應(yīng)用。
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