[發(fā)明專利]一種高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6-(2-羥乙基)腺苷的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110553647.7
• 申請日: 2021-05-20
• 公開（公告）號: CN113480587A
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 付婷偉;邵穎;陳安徽;彭雙雙;呂韓;劉妍妍;何曉波;姚澤潤
• 申請（專利權(quán)）人: 徐州工程學(xué)院
• 主分類號: C07H19/167
• 分類號: C07H19/167;C07H1/08;A01G18/00;A01G18/20
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

本發(fā)明屬于食用菌活性成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6?(2?羥乙基)腺苷的方法。本發(fā)明所述高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6?(2?羥乙基)腺苷的方法，在現(xiàn)有技術(shù)傳統(tǒng)的乙醇提取?樹脂分離?制備型色譜分離的提取方法的基礎(chǔ)上，通過在乙醇提取步驟中加入肌氨酸的方式進(jìn)行輔助提取，有助于提高N6?(2?羥乙基)腺苷的提取效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食用菌活性成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6-(2-羥乙基)腺苷的方法。

背景技術(shù)

N6-(2-羥乙基)腺苷(N6-(2-hydroxyethyl)adenosine，HEA)是從蟬花蟲草菌絲體中提取的腺苷類衍生物，是蟲草的特有成分，已報(bào)道的功能包括殺菌、抗癌和抗驚厥等，并具有Ca²⁺拮抗作用和肌肉收縮活性。HEA是目前已知的第一個(gè)生物來源的鈣離子拮抗劑，也是腺苷A1受體激動劑，使用DPCPX(腺苷A1受體拮抗劑)可以證明HEA是作用于腺苷A1受體，而蟲草獨(dú)特的藥用價(jià)值更促使其藥理學(xué)研究不斷發(fā)展。目前，HEA的含量是衡量蟲草品質(zhì)的重要指標(biāo)，但是，無論是天然蟲草還是人工蟲草，其HEA的含量均十分低，為HEA的提取造成了一定的困難，普遍存在著提取效率較低的問題。

發(fā)明內(nèi)容

為此，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6-(2-羥乙基)腺苷的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中HEA提取率較低的問題。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所述的一種高效提取蟬花蟲草子實(shí)體中N6-(2-羥乙基)腺苷的方法，包括如下步驟：

(1)取蟬花蟲草子實(shí)體進(jìn)行粉碎，加入乙醇溶液混勻，并加入肌氨酸進(jìn)行輔助提取；

(2)收集提取液以樹脂進(jìn)行分離，并以低濃度乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，經(jīng)濃縮干燥，備用；

(3)將所得濃縮物用低濃度甲醇溶液溶解，注入反相高效液相制備色譜進(jìn)行分離，收集制備圖譜中14.6-15.2min的色譜峰組分，干燥，即得。

具體的，所述步驟(1)中，所述肌氨酸的加入量占所述蟬花蟲草子實(shí)體用量的3-8wt％。

具體的，所述步驟(1)中，所述乙醇溶液的濃度為30-50v/v％。

具體的，所述步驟(1)中，所述乙醇溶液的用量為所述蟬花蟲草子實(shí)體用量的2-4倍量。

具體的，所述步驟(2)中，所述樹脂為D101大孔樹脂。

具體的，所述步驟(2)中，控制所述子實(shí)體與所述樹脂的用量比為1：8-12g/mL。

具體的，所述步驟(2)中，所述洗脫液為體積濃度15-25v/v％的乙醇溶液，使用量為3-5倍柱體積。

具體的，所述步驟(3)中，所述低濃度甲醇為體積分?jǐn)?shù)10-20v/v％的甲醇溶液，并配置樣品濃度為50-150mg/ml。

具體的，所述步驟(3)中，所述反相高效液相制備色譜條件包括：

色譜柱：C18鍵合相填料柱；

流動相：10-20v/v％甲醇-水溶液；

檢測波長：紫外檢測器260nm；

流動相流速：160ml/min；

進(jìn)樣量：10ml。

具體的，所述蟬花蟲草子實(shí)體為N6-(2-羥乙基)腺苷高含量子實(shí)體。

本發(fā)明所述的N6-(2-羥乙基)腺苷高含量蟬花蟲草子實(shí)體經(jīng)由可提高蟬花蟲草子實(shí)體中N6-(2-羥乙基)腺苷含量的方法栽培獲得，具體包括在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體菌種培養(yǎng)以及在固體培養(yǎng)基中進(jìn)行子實(shí)體培養(yǎng)的步驟；