[發明專利]SARS-CoV-2編碼蛋白來源的T細胞表位多肽及其應用

有效

• 申請號: 202110550991.0
• 申請日: 2021-05-18
• 公開（公告）號: CN113185586B
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發明（設計）人: 馬意朋;王明軍;林通;劉鳳蘭
• 申請（專利權）人: 深圳市因諾轉化醫學研究院;深圳因諾免疫有限公司
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;C12N15/50;C12N15/85;C12N5/10;C07K19/00;A61K38/16;A61K48/00;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 深圳市精英專利事務所 44242
• 代理人: 李瑩

本發明涉及生物醫學技術領域，具體涉及新型冠狀病毒(SARS?CoV?2)編碼蛋白來源的T細胞表位多肽及其應用。所述多肽具有誘導SARS?CoV?2特異性T細胞，協助控制SARS?CoV?2感染和病毒清除的特性。本發明還包含編碼所述多肽表位的融合蛋白、核苷酸序列或其互補序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的載體，以及包含所述多肽、融合蛋白、核酸分子或載體作為活性成分的藥物組合物，以及所述多肽、融合蛋白、核酸分子、載體、藥物組合物的用途。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，具體涉及新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)編碼蛋白來源的T細胞表位多肽及其應用。

背景技術

由SARS-CoV-2引起的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是世界范圍內當前最為迫切急需解決的公共衛生問題。COVID-19對我國和世界經濟發展產生了重大影響。

靶向SARS-CoV-2編碼的病毒蛋白(不局限于S蛋白)的特異性T細胞反應存在于COVID-19患者體內，在抑制SARS-CoV-2感染、病毒清除中發揮著重要的作用，可能有助于患者康復。近期的多項研究證實COVID-19重癥患者體內T淋巴細胞數量會顯著的較輕癥患者少，表明T細胞在控制或殺滅病毒方面發揮著重要作用。同時，針對COVID-19患者的臨床研究證實，部分患者在體內靶向結構蛋白的中和性抗體持續陰性的情況下也能清除病毒的感染。多項研究表明靶向SARS-CoV-2結構蛋白的中和性抗體在體內存在的時間較短。相較而言特異性記憶性T細胞在體內存活的時間會顯著的較長，這一特點在針對與SARS-CoV-2高度相似的MERS-CoV(中東呼吸綜合征冠狀病毒)和SARS-CoV-1(嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒)的研究中已經得到了驗證。

此外，在一項使用缺乏T細胞和B細胞的免疫缺陷小鼠作為宿主的模型中，研究者發現給感染了SARS-CoV-1(MA15 strain,Mouse Adapted 15strain)的小鼠回輸經一個SARS-CoV-1S蛋白來源的T細胞表位(S366)誘導的病毒特異性CD8+T細胞能加速病毒在小鼠體內的清除以及臨床病理的恢復。使用上述表位對具有正常免疫系統的BALB/C小鼠進行免疫，7天后使用致死劑量的SARS-CoV-1感染小鼠，發現經免疫的小鼠能加速病毒在體內的清除以及100％免于病毒的致死作用；相反，未經免疫或經空載樹突狀細胞免疫的小鼠的死亡率分別為70％和50％。在另一項更進一步的研究T細胞表位作為疫苗對SARS-CoV-1的感染提供持續性保護的動物實驗中，研究者使用一個SARS-CoV-1S蛋白來源的T細胞表位(S525)對BALB/C小鼠進行免疫，發現這個表位能誘導劇烈的T細胞免疫反應，且能在肺部和脾臟中檢測到病毒特異性T細胞的存在。為了研究病毒特異性記憶型T細胞的保護作用，在免疫后的第42-45天，使用致死劑量的SARS-CoV-1感染小鼠，發現經表位S525免疫的小鼠有80％的存活，相比之下，未免疫和使用GFP免疫的對照組小鼠存活率分別為0和20％。在SARS-CoV-1感染康復者體內檢測到病毒特異性記憶型CD8+T細胞能持續存在并維持功能達11年之久，而在此時間點，中和性抗體以及能產生中和性抗體的B細胞均不能檢測到。相似的，使用MERS-CoV感染的小鼠模型也發現，被一個MERS-CoV的T細胞表位免疫的小鼠能加速病毒清除，更快的從感染狀態恢復。這些研究結果表明CoV(冠狀病毒)抗原特異性T細胞介導的細胞免疫應答在控制CoV感染和病毒清除中發揮著重要作用。

當抗原呈遞細胞(Antigen Presenting Cell,APC)或被病毒感染的宿主細胞表達病毒蛋白后，胞漿中的病毒蛋白質抗原會被蛋白酶體降解成肽段，經轉運、加工后與人類白細胞抗原(Human Leukocyte Antigen,HLA)類分子結合，形成抗原肽—HLA分子復合物，轉移至細胞表面，被T細胞識別，活化T細胞。有效激發特異性T細胞免疫應答發揮抗病毒效能的關鍵在于鑒定SARS-CoV-2編碼蛋白來源的T細胞表位，這對開發安全有效的基于T細胞抗原表位的COVID-19預防性和治療性多肽疫苗有重要意義。

發明內容